Kea leboha ha u etetse Nature.com. Mofuta oa sebatli oo u o sebelisang o na le tšehetso e fokolang ea CSS. Bakeng sa liphetho tse ntle ka ho fetisisa, re khothaletsa hore o sebelise mofuta o mocha oa sebatli sa hau (kapa o tima Compatibility Mode ho Internet Explorer). Khabareng, ho netefatsa ts'ehetso e tsoelang pele, re hlahisa sebaka sena ntle le setaele kapa JavaScript.
Ho hōla ha likokoana-hloko maqeba hangata ho iponahatsa e le li-biofilms, tse sitisang pholiso 'me ho thata ho li felisa. Liaparo tse ncha tsa silevera li bolela hore li loantša tšoaetso ea maqeba, empa katleho ea tsona ea antibiofilm le liphello tsa pholiso tse ikemetseng ha li tsejoe hangata. Re sebelisa in vitro le in vivo biofilm mehlala ea Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa, re tlaleha katleho ea liaparo tse hlahisang ion tsa Ag1+; Liaparo tsa Ag1+ tse nang le ethylenediaminetetraacetic acid le benzethonium chloride (Ag1+/EDTA/BC), le liaparo tse nang le silver nitrate (Ag oxysalts). , e hlahisang li-ion tsa Ag1+, Ag2+ le Ag3+ ho loantša biofilm ea maqeba le phello ea eona pholisong. Liaparo tsa Ag1+ li bile le litlamorao tse fokolang ho biofilm ea maqeba in vitro le litoeba (C57BL/6j). Ka lehlakoreng le leng, matsoai a Ag a nang le oksijene le liaparo tsa Ag1 +/EDTA/BC li fokolitse haholo palo ea libaktheria tse phelang ka har'a biofilms in vitro 'me li bontšitse phokotso e kholo ea likarolo tsa baktheria le EPS ho li-biofilms tsa maqeba a litoeba. Liaparo tsena li ne li e-na le liphello tse sa tšoaneng pholisong ea maqeba a nang le tšoaetso ea biofilm le a se nang biofilm, ka liaparo tsa letsoai tse nang le oksijene tse nang le liphello tse molemo ho reepithelialization, boholo ba maqeba le ho ruruha ha ho bapisoa le phekolo ea ho laola le liaparo tse ling tsa silevera. Mefuta e fapa-fapaneng ea lik'hemik'hale tsa lik'hemik'hale tsa silevera e ka 'na ea e-ba le liphello tse fapaneng ho biofilm ea maqeba le pholiso,' me sena se lokela ho nahanoa ha ho khethoa seaparo sa ho alafa maqeba a nang le tšoaetso ea biofilm.
Maqeba a sa foleng a hlalosoa e le "maqeba a hlōlehang ho tsoela pele ka mekhahlelo e tloaelehileng ea ho fola ka mokhoa o hlophisitsoeng le o nakong" 1. Maqeba a sa foleng a baka moroalo kelellong, sechabeng le moruong bakeng sa bakuli le tsamaiso ea tlhokomelo ea bophelo. Chelete ea selemo le selemo ea NHS ho phekola maqeba le li-comorbidities tse amanang le eona e hakanngoa ho £ 8.3 limilione tse likete ho 2017-182. Maqeba a sa foleng le hona joale ke bothata bo matla United States, 'me Medicare e hakanya litšenyehelo tsa selemo le selemo tsa ho phekola bakuli ba maqeba ho $28.1–$96.8 billion3.
Tšoaetso ke ntho e ka sehloohong e thibelang ho fola ha maqeba. Hangata tšoaetso e bonahala e le li-biofilms, tse teng ho 78% ea maqeba a sa foleng a sa foleng. Li-biofilms li theha ha likokoana-hloko li khomarela holimo, joalo ka bokaholimo ba maqeba, 'me li ka kopana ho theha lichaba tse hlahisang li-extracellular polymer (EPS). Leqeba la biofilm le amahanngoa le karabelo e eketsehileng ea ho ruruha e lebisang ho senyeha ha lisele, tse ka liehang kapa tsa thibela pholiso4. Keketseho ea tšenyo ea lisele e ka bakoa ke karolo e 'ngoe ea ts'ebetso e eketsehileng ea matrix metalloproteinase, collagenase, elastase le mefuta e mengata ea oksijene e sebetsang5. Ho feta moo, lisele tsa ho ruruha le li-biofilms ka botsona ke bareki ba phahameng ba oksijene 'me ka hona li ka baka hypoxia ea lisele tsa lehae, ho fokotsa lisele tsa oksijene ea bohlokoa e hlokahalang bakeng sa tokiso e sebetsang ea lisele6.
Lifilimi tse hōlileng tsebong li hanyetsana haholo le li-antimicrobial agents, tse hlokang mekhoa e matla ea ho laola tšoaetso ea biofilm, joalo ka phekolo ea mechine e lateloang ke phekolo e sebetsang ea likokoana-hloko. Hobane biofilm e ka inchafatsa ka potlako, li-antimicrobial tse sebetsang hantle li ka fokotsa kotsi ea ho etsoa bocha kamora ho senyeha ha opereishene7.
Silevera e ntse e sebelisoa ka ho eketsehileng liphahlong tse thibelang likokoana-hloko 'me hangata e sebelisoa e le phekolo ea pele bakeng sa maqeba a sa foleng a tšoaelitsoeng. Ho na le liaparo tse ngata tsa silevera tse fumanehang khoebong, e 'ngoe le e' ngoe e na le sebopeho se fapaneng sa silevera, mahloriso le matrix a motheo. Tsoelo-pele ea masela a matsoho a silevera e lebisitse ho nts'etsopele ea maqhama a macha a silevera. Sebopeho sa tšepe sa silevera (Ag0) ke inert; Ho finyella katleho ea likokoana-hloko, e tlameha ho lahleheloa ke elektronike ho theha silevera ea ionic (Ag1 +). Liaparo tsa khale tsa silevera li na le metsoako ea silevera kapa silevera ea tšepe eo, ha e le mokelikeli, e bolang ho theha Ag1+ ion. Li-ion tsena tsa Ag1+ li sebetsana le sele ea baktheria, li tlosa lielektrone likarolong tsa meralo kapa lits'ebetso tsa bohlokoa tse hlokahalang bakeng sa ho phela. Theknoloji e nang le tokelo ea molao e lebisitse ho nts'etsopele ea motsoako o mocha oa silevera, Ag oxysalts (silver nitrate, Ag7NO11), e kenyelletsoeng ho apara maqeba. Ho fapana le silevera ea setso, ho bola ha letsoai le nang le oksijene ho hlahisa maemo a silevera a nang le valence e phahameng (Ag1+, Ag2+ le Ag3+). Liphuputso tsa in vitro li bontšitse hore likhahla tse tlaase tsa letsoai la silevera la oksijene li sebetsa ho feta silevera e le 'ngoe ea ion (Ag1 +) khahlanong le libaktheria tsa pathogenic tse kang Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus le Escherichia coli8,9. Mofuta o mong o mocha oa moaparo oa silevera o kenyelletsa metsoako e meng, e leng ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) le benzethonium chloride (BC), tseo ho tlalehoang hore li lebisa biofilm EPS 'me kahoo li eketsa ho kenella ha silevera ka biofilm. Litheknoloji tsena tse ncha tsa silevera li fana ka mekhoa e mecha ea ho shebana le biofilm ea maqeba. Leha ho le joalo, phello ea likokoana-hloko tsena tikolohong ea maqeba le pholiso e ikemetseng ea tšoaetso ke ea bohlokoa ho etsa bonnete ba hore ha li thehe tikoloho e sa thabiseng ea maqeba kapa ho lieha ho fola. Matšoenyeho a in vitro silver cytotoxicity a tlalehiloe ka liaparo tse 'maloa tsa silevera10,11. Leha ho le joalo, in vitro cytotoxicity ha e so fetoleloe ho chefo ea vivo, 'me liaparo tse' maloa tsa Ag1+ li bonts'itse boemo bo botle ba polokeho12.
Mona, re ile ra etsa lipatlisiso ka katleho ea liaparo tsa carboxymethylcellulose tse nang le liqapi tse ncha tsa silevera khahlano le leqeba la biofilm in vitro le in vivo. Ho phaella moo, liphello tsa liaparo tsena ho likarabo tsa 'mele oa ho itšireletsa mafung le pholiso e ikemetseng ea tšoaetso li ile tsa hlahlojoa.
Liaparo tsohle tse neng li sebelisoa li ne li rekisoa. 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, UK) ke seaparo se se nang antimicrobial sa 100% carboxymethylcellulose (CMC) se sebelisitsoeng e le mokhoa oa ho laola thutong ena. Liaparo tse tharo tsa silevera tsa CMC tsa antimicrobial li ile tsa hlahlojoa, e leng 3M Kerracel Ag dressing (3M, Knutsford, UK), e nang le 1.7 wt%. letsoai la silevera le oksijene (Ag7NO11) ka li-ion tsa silevera tse phahameng tsa valence (Ag1+, Ag2+ le Ag3+). Nakong ea ho bola ha li-ion tsa Ag7NO11, Ag1+, Ag2+ le Ag3+ li thehoa ka karolelano ea 1:2:4. Aquacel Ag Extra dressing e nang le 1.2% silver chloride (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, UK) 13 le Aquacel Ag + Extra dressing e nang le 1.2% silver chloride (Ag1+), EDTA le benzethonium chloride (ConvaTec, Deeside, UK) 14.
Mefuta e sebelisitsoeng thutong ena e ne e le Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) le Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
Libaktheria li ile tsa lengoa ka bosiu bo le bong moro oa Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, UK). Setso sa bosiu se ile sa hlapolloa 1:100 ka Mueller-Hinton broth 'me 200 µl e tšeloa holim'a sterile 0.2 µm Whatman cyclopore membranes (Whatman plc, Maidstone, UK) holim'a lipoleiti tsa agar tsa Mueller-Hinton (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Kent. ). ) Sebopeho sa biofilm ea bokolone ho 37°C bakeng sa lihora tse 24. Lifilimi tsena tsa bokolone li ile tsa lekoa bakeng sa shrinkage ea logarithmic.
Khaola seaparo ka likotoana tsa lisekoere tse 3 cm2 'me u kolobise pele ka metsi a hloekisitsoeng a hloekileng. Beha tlamisa holim'a biofilm ea kolone holim'a poleiti ea agar. Lihekthere tse ling le tse ling tse 24 tsa biofilm li ile tsa tlosoa, 'me libaktheria tse sebetsang ka har'a biofilm (CFU / ml) li ne li lekantsoe ka ho hlapolla ha serial (10-1 ho 10-7) ka moro oa Day-Angle neutralization (Merck-Millipore). Ka mor'a lihora tse 24 tsa incubation ka 37 ° C, lipalo tse tloaelehileng tsa lipoleiti li ile tsa etsoa lipoleiting tsa agar tsa Mueller-Hinton. Kalafo e 'ngoe le e' ngoe le ntlha ea nako li ne li etsoa ka makhetlo a mararo, 'me lipalo tsa lipoleiti li phetoa bakeng sa dilution ka' ngoe.
Letlalo la mpa ea nama ea kolobe le fumanoa ho likolobe tse tšehali tsa Large White nakong ea metsotso e 15 ea polao ho latela litekanyetso tsa kantle ho naha tsa European Union. Letlalo le ne le kuta le ho hloekisoa ka lisebelisoa tsa joala, ebe le leqhoa ho -80 ° C ka lihora tse 24 ho senya letlalo. Ka mor'a ho qhibiliha, likotoana tsa letlalo tse 1 cm2 li ne li hlatsuoa ka makhetlo a mararo ka PBS, 0.6% sodium hypochlorite, le 70% ethanol metsotso e 20 nako le nako. Pele o tlosa epidermis, tlosa ethanol leha e le efe e setseng ka ho e hlatsoa ka makhetlo a 3 ka PBS e hloekisitsoeng. Letlalo le ne le entsoe ka poleiti ea liliba tse 6 e nang le lera la nylon e teteaneng ea 0.45-μm (Merck-Millipore) ka holimo le liphahlo tse 3 tse monyang (Merck-Millipore) tse nang le 3 ml fetal bovine serum (Sigma) e tlatsitsoeng ka 10% Dulbecco's modified. Ntsu. Mahareng (Dulbecco's Modified Eagle Medium – Aldrich Ltd.).
Li-biofilm tsa bokolone li ile tsa lengoa joalo ka ha ho hlalositsoe bakeng sa lithuto tsa pepenene ea biofilm. Ka mor'a ho hlaolela biofilm holim'a lera ka lihora tse 72, biofilm e ile ea sebelisoa holim'a letlalo ho sebelisa lesela le hloekisitsoeng la inoculation 'me lera la tlosoa. Joale biofilm e ile ea kenngoa letlalong la kolobe bakeng sa lihora tse eketsehileng tsa 24 ho 37 ° C ho lumella biofilm hore e hōle le ho khomarela letlalo la kolobe. Ka mor'a hore biofilm e hōlile 'me e khomarele, seaparo sa 1.5 cm2, se kolobisitsoeng pele ka metsi a hloekisitsoeng a sa hloekang, se ne se sebelisoa ka ho toba holim'a letlalo mme se kenngoa ka 37 ° C ka lihora tse 24. Libaktheria tse sebetsang li ile tsa bonoa ka ho silafatsa ka ho sebelisa ka mokhoa o ts'oanang PrestoBlue cell viability reagent (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, UK) sebakeng sa apical sa semela se seng le se seng ebe se e kenya ka metsotso e 5. Sebelisa kh'amera ea dijithale ea Leica DFC425 ho nka litšoantšo hang hang ka maekorosekopo ea Leica MZ8. Libaka tse pinki tse mebala li ile tsa lekanngoa ho sebelisoa mofuta oa 10 oa software ea Image Pro (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)). Ho hlahloba microscope ea elektronike ho ile ha etsoa joalokaha ho hlalositsoe ka tlase.
Libaktheria tse hōlileng ka bosiu bo le bong li hlakotsoe ka 1:100 ka moro oa Mueller-Hinton. 200 μl ea setso e kentsoe ho sterile 0.2 μm Whatman cyclopore membrane (Whatman, Maidstone, UK) mme e pentiloe holim'a Mueller-Hinton agar. Lipoleiti tsa Biofilm li ile tsa kenngoa ka 37 ° C bakeng sa lihora tse 72 ho lumella ho thehoa ha biofilm e hōlileng.
Ka mor'a matsatsi a 3 a ho hōla ha biofilm, bandage ea 3 cm2 ea lisekoere e ile ea behoa ka ho toba biofilm 'me e kenngoa ka 37 ° C bakeng sa lihora tse 24. Ka mor'a ho tlosa letlapa holim'a biofilm, 1 ml ea PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA) e ile ea eketsoa ka holim'a biofilm ka 'ngoe bakeng sa metsotsoana ea 20. Libaka li ne li omisitsoe pele liphetoho tsa mebala li rekotoa ho sebelisoa k'hamera ea digital ea Nikon D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, UK).
Lokisetsa meetlo ea bosiu ka Mueller-Hinton agar, fetisetsa likolone ka bomong ho 10 ml ea Mueller-Hinton moro 'me u etsetse ka shaker ka 37°C (100 rpm). Kamora ho fuama bosiu bo le bong, setso se ile sa hlapolwa 1:100 ka Mueller-Hinton broth mme 300 µl e ile ya bonwa ho 0.2 µm circular Whatman cyclopore membrane (Whatman International, Maidstone, UK) ho Mueller-Hinton agar mme ya emiswa ka 37°C nakong ya dihora tse 72. . . Biofilm e hōlileng tsebong e ile ea sebelisoa leqebeng joalokaha ho hlalositsoe ka tlase.
Mosebetsi oohle le liphoofolo o ile oa etsoa Univesithing ea Manchester tlas'a laesense ea morero e amohetsoeng ke Ofisi ea Boiketlo ba Liphoofolo le Tlhahlobo ea Boitšoaro (P8721BD27) le ho latela tataiso e hatisitsoeng ke Ofisi ea Lehae tlas'a ASPA e ntlafalitsoeng ea 2012. Bangoli bohle ba ile ba latela litataiso tsa ho fihla. Litoeba tsa C57BL/6j tsa libeke tse robeli (Envigo, Oxon, UK) li ne li sebelisoa bakeng sa lithuto tsohle tsa vivo. Litoeba li ile tsa hlajoa ka isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK) 'me bokaholimo ba tsona bo ile ba beoloa le ho hloekisoa. Peba e 'ngoe le e 'ngoe e ile ea fuoa leqeba la 2 × 6 mm ho sebelisa sekontiri sa Stiefel biopsy (Schuco International, Hertfordshire, UK). Bakeng sa maqeba a tšoaelitsoeng ke biofilm, sebelisa biofilm ea lihora tse 72 ea bokolone e hōlileng holim'a lera joalokaha ho hlalositsoe ka holimo ho dermal layer ea leqeba u sebelisa sterile inoculation loop hang ka mor'a kotsi 'me u lahle lera. Sekwere sentimetara e le 'ngoe ea ho roala e kolobisitsoe pele ka metsi a sa hloekang ho boloka tikoloho ea maqeba a mongobo. Liaparo li ne li sebelisoa ka ho toba leqebeng le leng le le leng 'me li koahetsoe ka filimi ea 3M Tegaderm (3M, Bracknell, UK) le sekhomaretsi sa metsi sa Mastisol (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) se sebelisitsoeng ho pota-potile ho fana ka sekhomaretsi se eketsehileng. Buprenorphine (Animalcare, York, UK) e ne e sebelisoa ka bongata ba 0.1 mg/kg e le sethethefatsi. Hlakola litoeba ka mor'a matsatsi a mararo ka mor'a kotsi u sebelisa mokhoa oa Shejule 1 'me u tlose, u khaole, 'me u boloke sebaka sa leqeba ha ho hlokahala.
Ho silafatsa ka Hematoxylin (ThermoFisher Scientific) le eosin (ThermoFisher Scientific) ho ile ha etsoa ho latela melaoana ea moetsi. Sebaka sa maqeba le reepithelialization li ile tsa lekanyetsoa ka tšebeliso ea software ea Image Pro version 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Likarolo tsa mahlahahlaha li ile tsa tšeloa ka har'a xylene (ThermoFisher Scientific, Loughborough, UK), tsa khutlisetsoa metsi ka ethanol ea graded ea 100-50%, 'me ea qoelisoa ka nakoana ka metsing a entsoeng ka deionized (ThermoFisher Scientific). Immunohistochemistry e ne e etsoa ho sebelisoa VectaStain Elite ABC PK-6104 kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) ho latela protocol ea moetsi. Li-antibodies tsa mantlha ho li-neutrophils NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) le macrophages Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) li ile tsa hlapolloa 1:100 ka tharollo e thibelang 'me ea kenngoa sebakeng se sehiloeng, se lateloa ke li-antibodies tse 2 Anti-, VectaStain. ABC le Vector Nova Red Peroxidase (HRP) substrate kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) mme e na le hematoxylin. Litšoantšo li ile tsa fumanoa ho sebelisoa microscope ea Olympus BX43 le k'hamera ea digital ea Olympus DP73 (Olympus, Southend-on-Sea, UK).
Mehlala ea letlalo e ne e tsitsitsoe ka 2.5% glutaraldehyde le 4% formaldehyde ho 0.1 M HEPES (pH 7.4) bakeng sa lihora tse 24 ho 4 ° C. Mehlala e ile ea felloa ke metsi ka ho sebelisa ethanol e hlophisitsoeng 'me e omisitsoe ho CO2 ho sebelisoa Quorum K850 key dryer (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK) le sputter e koahetsoeng ka khauta-palladium alloy e sebelisa Quorum SC7620 mini sputterer / glow discharge system. Mehlala e ile ea nkuoa ho sebelisoa maekerosekoupo ea elektronike ea FEI Quanta 250 (ThermoFisher Scientific) ho bona ntlha e bohareng ea leqeba ka mahlo a kelello.
Toto-1 iodide (2 μM) e ne e sebelisoa holim'a leqeba le chesitsoeng la mouse 'me ea kenngoa metsotso e 5 ho 37 °C (ThermoFisher Scientific)' me ea phekoloa ka Syto-60 (10 μM) ho 37 ° C (ThermoFisher Scientific). Litšoantšo tsa metsotso e 15 tsa Z-stack li entsoe ho sebelisoa Leica TCS SP8.
Lintlha tse kopitsoang tsa baeloji le tsa tekheniki li ile tsa hlophisoa le ho hlahlobisisoa ho sebelisoa software ea Graphpad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). Tshekatsheko ya mokgwa o le mong wa ho se tshwane le dipapiso tse ngata ho sebediswa teko ya Dunnett ya post hoc e ile ya sebediswa ho lekola phapang pakeng tsa kalafo e nngwe le e nngwe le moaparo wa taolo e seng antimicrobial. P value <0.05 e ne e nkoa e le ea bohlokoa.
Tšebeliso e ntle ea liaparo tsa gel ea silevera e ile ea hlahlojoa pele khahlanong le li-colone tsa biofilm tsa Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa in vitro. Liaparo tsa silevera li na le mekhoa e fapaneng ea silevera: liaparo tsa silevera tsa setso li hlahisa li-ion tsa Ag1 +; liaparo tsa silevera, tse ka hlahisang li-ion tsa Ag1 + ka mor'a ho eketsoa ha EDTA / BC, li ka senya matrix a biofilm le ho pepesa libaktheria ho silevera tlas'a phello ea antibacterial ea silevera. li-ion15 le litlolo tse nang le letsoai la Ag le nang le oksijene le hlahisang li-ion tsa Ag1+, Ag2+ le Ag3+. Ho sebetsa ha eona ho ile ha bapisoa le moaparo oa ho laola o sa sebeliseng likokoana-hloko o entsoeng ka likhoele tsa gelled. Libaktheria tse setseng ka har'a biofilm li ile tsa hlahlojoa lihora tse ling le tse ling tsa 24 bakeng sa matsatsi a 8 (Setšoantšo sa 1). Ka letsatsi la 5, biofilm e ile ea tsosolosoa ka 3.85 × 105S. Staphylococcus aureus kapa 1.22 × 105P. aeruginosa ho hlahloba ho hlaphoheloa ha biofilm. Ha ho bapisoa le liphahlo tse se nang lithibela-mafu, liaparo tsa Ag1+ li bile le phello e fokolang ho matla a baktheria ho Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa biofilms ka matsatsi a 5. Ka lehlakoreng le leng, liaparo tse nang le letsoai la Ag le Ag1+ + EDTA/BC tse nang le oksijene li ne li atleha ho bolaea libaktheria ka har'a biofilm nakong ea matsatsi a 5. Ka mor'a ho kenngoa khafetsa le libaktheria tsa planktonic ka letsatsi la 5, ha ho tsosolosoe ha biofilm e ileng ea hlokomeloa (setšoantšo sa 1).
Quantification ea libaktheria tse sebetsang ho Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa biofilms ka mor'a ho phekoloa ka liaparo tsa silevera. Likolone tsa Biofilm tsa Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa li ne li phekoloa ka liaparo tsa silevera kapa li-antimicrobial dressings, 'me palo ea libaktheria tse phelang tse setseng e ile ea khethoa lihora tse ling le tse ling tse 24. Ka mor'a matsatsi a 5, biofilm e ile ea tsosolosoa ka 3.85 × 105S. Staphylococcus aureus kapa 1.22 × 105P. Likolone tsa bacterioplankton Pseudomonas aeruginosa li ile tsa thehoa ka bonngoe ho hlahloba ho hlaphoheloa ha biofilm. Kerafo e bontša ho bolela +/- phoso e tloaelehileng.
Ho bona ka mahlo a kelello phello ea liaparo tsa silevera ka matla a biofilm, liaparo li ile tsa sebelisoa ho li-biofilms tse hōlileng tsebong tse hōlileng letlalong la porcine ex vivo. Ka mor'a lihora tse 24, ho roala ho tlosoa 'me biofilm e silafatsoa ka dae e putsoa e sebetsang, e sebelisoang ke libaktheria tse phelang ho' mala o pinki. Li-biofilms tse tšoaroang ka liaparo tsa ho laola li ne li le pinki, tse bontšang boteng ba libaktheria tse phelang ka har'a biofilm (Setšoantšo sa 2A). Ka lehlakoreng le leng, biofilm e tšoaroang ka liaparo tsa Ag oxysols e ne e le putsoa haholo-holo, e leng se bontšang hore libaktheria tse setseng holim'a letlalo la kolobe e ne e le libaktheria tse sa khoneng ho phela (Setšoantšo sa 2B). 'Mala o tsoakiloeng o moputsoa le o mopinki o ile oa bonoa lifiliming tsa biofilm tse tšoaroang ka liphahlo tse nang le Ag1+, tse bonts'ang boteng ba libaktheria tse sebetsang le tse sa sebetseng ka har'a biofilm (setšoantšo sa 2C), athe liaparo tsa EDTA/BC tse nang le Ag1+ li ne li le putsoa haholo ka matheba a pinki. e bontšang libaka tse sa ameheng ke ho apara silevera (Setšoantšo sa 2D). Quantification ea libaka tse sebetsang (pinki) le tse sa sebetseng (tse putsoa) li bontšitse hore patch ea taolo e ne e le 75% e sebetsang (Figure 2E). Liaparo tsa Ag1+ + EDTA/BC li entsoe ka mokhoa o ts'oanang le litlolo tsa letsoai tsa Ag tse nang le oksijene, ka litekanyetso tsa ho pholoha tsa 13% le 14%, ka ho latellana. Moaparo oa Ag1+ o boetse o fokolitse ho sebetsa ha baktheria ka 21%. Joale li-biofilm tsena li ile tsa bonoa ho sebelisoa scanning electron microscopy (SEM). Ka mor'a ho phekoloa ka ho apara ho laola le ho apara Ag1 +, ho ile ha hlokomeloa lesela la Pseudomonas aeruginosa le koahelang letlalo la kolobe (Setšoantšo sa 2F, H), athe ka mor'a ho phekoloa ka ho apara Ag1 +, ho ile ha fumanoa lisele tse seng kae tsa baktheria 'me ho fumanoe lisele tse seng kae tsa baktheria ka tlas'a eona. Likhoele tsa collagen li ka nkoa e le sebopeho sa lisele tsa letlalo la porcine (Setšoantšo sa 2G). Ka mor'a ho phekoloa ka liaparo tsa Ag1 + + EDTA / BC, li-plaque tsa baktheria le li-collagen fiber plaques tse ka tlaase li ile tsa bonahala (Setšoantšo sa 2I).
Pono ea Pseudomonas aeruginosa biofilm ka mor'a kalafo ea moaparo oa silevera. (A-D) Ho sebetsa ha baktheria ho li-biofilms tsa Pseudomonas aeruginosa tse hōlileng letlalong la nama ea kolobe li ile tsa bonoa ka dae ea PrestoBlue ka mor'a lihora tse 24 ka mor'a ho phekoloa ka liaparo tsa silevera kapa liaparo tse sa sebeliseng likokoana-hloko. Likokoana-hloko tse phelang li pinki, libaktheria tse sa pheleng le letlalo la kolobe li putsoa. (E) Bongata ba li-biofilm tsa Pseudomonas aeruginosa tse hōlileng letlalong la porcine (pinki letheba) ho sebelisoa scanning electron microscopy Image Pro version 10 (FI) le ho phekoloa ka moaparo oa silevera kapa moaparo o sa sebeliseng likokoana-hloko bakeng sa lihora tse 24. SEM bar sekala = 5 µm. (J–M) Lifilimi tsa bokolone tsa bokolone li ile tsa hola ka lifilthara 'me tsa silafatsoa ka dae e sebetsang ea PrestoBlue ka mor'a lihora tse 24 tsa incubation ka liaparo tsa silevera.
Ho fumana hore na kamano e haufi pakeng tsa liaparo le li-biofilms e ama katleho ea liaparo, li-biofilms tsa bokolone tse behiloeng holim'a sephara li ne li tšoaroa ka liaparo tsa lihora tsa 24 ebe li silafatsoa ka lidae tse sebetsang. Biofilm e sa phekoloang e ne e le pinki e lefifi ka 'mala (Setšoantšo sa 2J). Ho fapana le li-biofilms tse tšoaroang ka litlolo tse nang le letsoai la Ag le nang le oksijene (Setšoantšo sa 2K), li-biofilms tse tšoaroang ka liaparo tse nang le Ag1+ kapa Ag1+ + EDTA/BC li ne li bonts'a lihlopha tsa mebala e pinki (Setšoantšo sa 2L, M). 'Mala ona o pinki o bontša boteng ba libaktheria tse sebetsang' me o amahanngoa le sebaka sa suture ka hare ho ho apara. Libaka tsena tse rokeletsoeng li theha libaka tse shoeleng tse lumellang libaktheria tse ka har'a biofilm ho phela.
Ho lekola katleho ea liaparo tsa silevera ka vivo, maqeba a botenya bo felletseng a litoeba tse tšoaelitsoeng ke li-biofilm tse holileng tsa S. aureus le P. aeruginosa li ne li phekoloa ka liphahlo tse sa laoleheng kapa liaparo tsa silevera. Ka mor'a matsatsi a 3 a phekolo, tlhahlobo ea setšoantšo sa macroscopic e bontšitse boholo ba maqeba a manyenyane ha o phekoloa ka masela a letsoai a nang le oksijene ha a bapisoa le liaparo tse sa sebeliseng likokoana-hloko le liaparo tse ling tsa silevera (Setšoantšo sa 3A-H). Ho netefatsa litebello tsena, maqeba a ile a kotuloa le sebaka sa maqeba 'me reepithelialization e ile ea lekanyetsoa likarolong tsa hematoxylin le eosin-stained tissue ho sebelisoa setšoantšo sa pro software version 10 (Figure 3I-L).
Phello ea liaparo tsa silevera holim'a leqeba le ho tsosolosa maqeba a tšoaelitsoeng ke li-biofilms. (A–H) Lisele tse nyenyane tse tšoaelitsoeng ke li-biofilms tsa Pseudomonas aeruginosa (A–D) le Staphylococcus aureus (E–H) ka mor’a matsatsi a mararo a phekolo ka moaparo oa ho laola o se nang likokoana-hloko, moaparo oa letsoai oa Ag o nang le oksijene, seaparo sa Ag1+, le Ag1+ ho roala. Moemeli oa litšoantšo tsa macroscopic. maqeba a litoeba tse nang le liaparo tsa Ag1+ + EDTA/BC. (IL) Moemeli oa tšoaetso ea Pseudomonas aeruginosa, likarolo tsa histological tse nang le hematoxylin le eosin, tse sebelisetsoang ho lekanya sebaka sa maqeba le ho tsosolosoa ha epithelial. Quantification ea sebaka sa maqeba (M, O) le peresente ea reepithelialization (N, P) ea maqeba a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa (M, N) le Staphylococcus aureus (O, P) biofilms (ka sehlopha sa phekolo n = 12). Kerafo e bontša ho bolela +/- phoso e tloaelehileng. * e bolela p = <0.05 ** e bolela p = <0.01; Sekala sa macroscopic = 2.5 mm, sekala sa histological = 500 µm.
Quantification ea sebaka sa maqeba a maqeba a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa biofilm (Figure 3M) e bontšitse hore maqeba a phekoloang ka Ag oxysalts a ne a e-na le boholo ba leqeba la 2.5 mm2, ha ho roala ho se nang antimicrobial ho ne ho e-na le boholo ba leqeba la 3.1 mm2. 'nete. fihla bohlokoa ba lipalo-palo (Figure 3M). p = 0,423). Maqeba a phekoloang ka Ag1 + kapa Ag1 + + EDTA/BC ha aa ka a bontša ho fokotseha ha sebaka sa maqeba (3.1 mm2 le 3.6 mm2, ka ho latellana). Kalafo ka ho roala letsoai la Ag e nang le oksijene e ile ea khothalletsa ho tsosolosoa ha epithelialization ka tekanyo e kholo ho feta ho apara ho se nang antimicrobial (34% le 15%, ka ho latellana; p = 0.029) le Ag1 + kapa Ag1 + + EDTA/BC (10% le 11%). Setšoantšo sa 3N). . , ka tatelano).
Mekhoa e tšoanang sebakeng sa maqeba le ho tsosolosoa ha epithelial e ile ea hlokomeloa ka maqeba a tšoaelitsoeng ke S. aureus biofilms (Setšoantšo sa 3O). Liaparo tse nang le letsoai la silevera la oksijene li fokolitse sebaka sa leqeba (2.0 mm2) ka 23% ha se bapisoa le ho apara liaparo tse sa sebeliseng likokoana-hloko (2.6 mm2), le hoja phokotso ena e ne e se ea bohlokoa (p = 0.304) (setšoantšo sa 3O). Ho phaella moo, sebaka sa maqeba sehlopheng sa phekolo ea Ag1 + se fokotsehile hanyenyane (2.4 mm2), ha leqeba le phekoloang ka Ag1 + + EDTA / BC ho apara ha lea ka la fokotsa sebaka sa maqeba (2.9 mm2). Matsoai a oksijene a Ag a boetse a khothalletsa ho tsosolosoa ha maqeba a tšoaelitsoeng ke S. aureus biofilm (31%) ho feta ba tšoaroang ka liaparo tse sa sebeliseng likokoana-hloko (12%, p = 0.003) (Setšoantšo sa 3P). Ho apara ka Ag1 + (16%, p = 0.903) le Ag + 1 + EDTA / BC ho apara (14%, p = 0.965) ho bontšitse maemo a ho tsosolosoa ha epithelial ho tšoana le ho laola.
Ho bona ka mahlo a kelello phello ea liaparo tsa silevera ka matrix a biofilm, Toto 1 le Syto 60 staining iodide e ile ea etsoa (setšoantšo sa 4). Toto 1 iodide ke dae e sa keneng liseleng e ka sebelisoang ho bona ka nepo li-nucleic acid tsa extracellular, tse ngata ho EPS ea biofilms. Syto 60 ke dae e khonang ho kenella liseleng e sebelisoang joalo ka counterstain16. Maikutlo a Toto 1 le Syto 60 iodide ka maqeba a kenngoa ka biofilms ea Pseudomonas aeruginosa (Setšoantšo sa 4A-D) le Staphylococcus aureus (Setšoantšo sa 4I-L) se bontšitse hore ka mor'a matsatsi a 3 a phekolo ea ho apara, EPS ka biofilm e fokotsehile haholo. e nang le matsoai a oksijene Ag le Ag1+ + EDTA/BC. Liaparo tsa Ag1 + ntle le lisebelisoa tse eketsehileng tsa antibiofilm li fokolitse haholo DNA e se nang lisele maqeba a kenngoeng ka Pseudomonas aeruginosa empa e ne e sa sebetse hantle maqeba a nang le Staphylococcus aureus.
In vivo imaging ea leqeba la biofilm ka mor'a matsatsi a 3 a kalafo ka taolo kapa liaparo tsa silevera. Litšoantšo tsa Confocal tsa Pseudomonas aeruginosa (A-D) le Staphylococcus aureus (I-L) e silafalitsoeng ka Toto 1 (e tala) ho bona ka mahlo a kelello a extracellular nucleic acids, e leng karolo ea extracellular biofilm polymers. Ho silafatsa li-nucleic acid tsa intracellular, sebelisa Syto 60 (e khubelu). acid. P. Ho hlahloba electron microscopy ea maqeba a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa (E-H) le Staphylococcus aureus (M-P) biofilms ka mor'a matsatsi a 3 a phekolo ka taolo le liaparo tsa silevera. SEM bar sekala = 5 µm. Sekala sa sekala sa Confocal = 50 µm.
Ho hlahloba microscopy ea elektronike ho bontšitse hore litoeba tse kenngoeng ka li-biofilm colonies tsa Pseudomonas aeruginosa (Setšoantšo sa 4E-H) le Staphylococcus aureus (Setšoantšo sa 4M-P) se ne se e-na le libaktheria tse fokolang haholo maqebeng a tsona ka mor'a matsatsi a 3 a phekolo ka liaparo tsohle tsa silevera.
Ho lekola phello ea liaparo tsa silevera ka ho ruruha ha leqeba litoeba tse tšoaelitsoeng ke biofilm, likarolo tsa maqeba a tšoaelitsoeng ke biofilm a tšoaroang ka taolo kapa liaparo tsa silevera bakeng sa matsatsi a 3 li ne li silafalitsoe ke immunohistochemically ka ho sebelisa li-antibodies tse khethehileng bakeng sa neutrophils le macrophages. Boikemisetso bo bongata ba li-neutrophils le macrophages ka hare. lisele tsa granulation. Setšoantšo sa 5). Liaparo tsohle tsa silevera li ile tsa fokotsa palo ea li-neutrophils le macrophages maqeba a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa ha a bapisoa le liaparo tse sa sebeliseng likokoana-hloko ka mor'a matsatsi a mararo a phekolo. Leha ho le joalo, phekolo e nang le moaparo oa letsoai oa silevera ea oksijene e ile ea fella ka ho fokotseha ho hoholo ha li-neutrophils (p = <0.0001) le macrophages (p = <0.0001) ha li bapisoa le liaparo tse ling tsa silevera tse lekiloeng (Setšoantšo sa 5I, J). Le hoja Ag1+ + EDTA/BC e bile le phello e kholo ho biofilm ea maqeba, e ile ea fokotsa maemo a neutrophil le macrophage ka tekanyo e fokolang ho feta ea ho apara Ag1 +. Maqeba a itekanetseng a tšoaelitsoeng ke S. aureus biofilm a ile a boela a hlokomeloa ka mor'a ho apara ka Ag (p = <0.0001), Ag1 + (p = 0.0008) le Ag1 ++ EDTA / BC (p = 0.0043) li-oxisol ha li bapisoa le taolo. Mekhoa e tšoanang e bonoa bakeng sa neutropenia. tlamisa (setšoantšo sa 5K). Leha ho le joalo, ho apara letsoai la oksijene ea Ag feela ho bontšitse ho fokotseha ho hoholo ha palo ea macrophages ka lisele tsa granulation ha li bapisoa le ho laola maqeba a tšoaelitsoeng ke S. aureus biofilms (p = 0.0339) (Setšoantšo sa 5L).
Li-neutrophils le macrophages li ne li lekantsoe ka maqeba a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa le Staphylococcus aureus biofilms ka mor'a matsatsi a 3 a phekolo ka taolo e se nang likokoana-hloko kapa liaparo tsa silevera. Li-neutrophils (AD) le macrophages (EH) li ile tsa lekanngoa likarolong tsa linama tse nang le li-antibodies tse khethehileng bakeng sa li-neutrophils kapa macrophages. Quantification ea neutrophils (I le K) le macrophages (J le L) maqeba a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa (I le J) le Staphylococcus aureus (K & L) biofilms. N = 12 ka sehlopha. Li-graph li bontša ho bolela +/- phoso e tloaelehileng, litekanyetso tsa bohlokoa ha li bapisoa le ho apara ho se nang antibacterial, * e bolela p = <0.05, ** e bolela p = <0.01; *** e bolela p = <0.001; e bontša p = <0.0001).
Ka mor'a moo re ile ra hlahloba phello ea liaparo tsa silevera ho pholiso e ikemetseng ea tšoaetso. Maqeba a sa tšoaetsanoang a sa tšoaetsanoeng a ne a phekoloa ka mokhoa o se nang likokoana-hloko kapa seaparo sa silevera bakeng sa matsatsi a 3 (Setšoantšo sa 6). Har'a liaparo tsa silevera tse lekiloeng, maqeba feela a phekoloang ka letsoai le nang le oksijene a ile a hlaha a le manyenyane litšoantšong tsa macroscopic ho feta maqeba a phekoloang ka taolo (Setšoantšo sa 6A-D). Palo ea sebaka sa maqeba ho sebelisa tlhahlobo ea histological e bontšitse hore sebaka se tloaelehileng sa maqeba ka mor'a ho phekoloa ka liaparo tsa Ag oxysols e ne e le 2.35 mm2 ha e bapisoa le 2.96 mm2 bakeng sa maqeba a tšoaroang le sehlopha sa taolo, empa phapang ena ha ea ka ea fihla bohlokoa ba lipalo (p = 0.488) (Fig. 6I). Ka lehlakoreng le leng, ha ho na ho fokotseha ha sebaka sa maqeba ho ile ha hlokomeloa ka mor'a phekolo ea Ag1 + (3.38 mm2, p = 0.757) kapa Ag1 + + EDTA / BC (4.18 mm2, p = 0.054) liaparo ha li bapisoa le sehlopha sa taolo. Ho tsosolosoa ha epithelial ho ile ha hlokomeloa ka moaparo oa Ag oxysol ha o bapisoa le sehlopha sa taolo (30% vs. 22%, ka ho latellana), le hoja sena se sa ka sa fihla bohlokoa (p = 0.067), sena ke sa bohlokoa haholo 'me se tiisa liphello tse fetileng. Ho apara ka li-oxysol ho khothalletsa ho tsosolosoa ha epithelialization. -Epithelization ea maqeba a sa tšoaetsanoang17. Ka lehlakoreng le leng, kalafo ka liphahlo tsa Ag1+ kapa Ag1++ EDTA/BC ha ea ka ea e-ba le phello kapa e bontšitse ho fokotseha ha epithelialization ha ho bapisoa le taolo.
Phello ea ho roala maqeba a silevera ho pholiso ea maqeba ho litoeba tse sa tšoaetsanoang tse nang le resection e feletseng. (AD) Moemeli oa litšoantšo tsa macroscopic tsa maqeba ka mor'a matsatsi a mararo a phekolo ka seaparo sa ho laola likokoana-hloko le seaparo sa silevera. (EH) Likarolo tse emelang maqeba a nang le hematoxylin le eosin. Tekanyo ea sebaka sa maqeba (I) le peresente ea reepithelialization (J) e ne e baloa ho tloha likarolong tsa histological bohareng ba leqeba ho sebelisa software ea ho hlahloba litšoantšo (n = 11-12 ka sehlopha sa phekolo). Kerafo e bontša ho bolela +/- phoso e tloaelehileng. * e bolela p = <0.05.
Silevera e na le histori e telele ea ho sebelisoa e le phekolo ea likokoana-hloko pholisong ea maqeba, empa mefuta e mengata e fapaneng ea mekhoa le mekhoa ea ho fana e ka 'na ea baka phapang ea katleho ea likokoana-hloko 18. Ho feta moo, thepa ea antibiofilm ea mekhoa e khethehileng ea ho fana ka silevera ha e utloisisoe ka botlalo. Leha karabelo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung e batla e sebetsa khahlano le libaktheria tsa planktonic, hangata ha e sebetse hantle khahlano le biofilms19. Libaktheria tsa Planktonic li phagocytosed habonolo ke macrophages, empa ka har'a li-biofilms, lisele tse kopaneng li baka mathata a eketsehileng ka ho fokotsa karabelo ea moeti ho isa tekanyong eo lisele tsa 'mele tsa ho itšireletsa mafung li ka bang le apoptosis le ho lokolla lintlha tsa proinflammatory ho matlafatsa karabelo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung20. Ho 'nile ha hlokomeloa hore li-leukocyte tse ling li ka phunyeletsa biofilms21 empa ha li khone ho phagocytose libaktheria hang ha tšireletso ena e senyehile22. Mokhoa o akaretsang o lokela ho sebelisoa ho ts'ehetsa karabelo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung khahlanong le tšoaetso ea leqeba la biofilm. Ho senyeha ha maqeba ho ka senya biofilm 'meleng' me ho tlosa boholo ba likokoana-hloko, empa karabo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung e ka' na ea se ke ea sebetsa khahlanong le biofilm e setseng, haholo-holo haeba karabelo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung e senyeha. Kahoo, litlhare tse thibelang likokoana-hloko tse kang liaparo tsa silevera li ka tšehetsa karabo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung le ho felisa tšoaetso ea biofilm. Sebopeho, mahloriso, solubility, le substrate ea ho fana li ka susumetsa katleho ea antimicrobial ea silevera. Lilemong tsa morao tjena, tsoelo-pele ea theknoloji ea ho sebetsana le silevera e entse hore liaparo tsena li atlehe haholoanyane9,23. Ha theknoloji ea ho roala silevera e ntse e tsoela pele, ke habohlokoa ho utloisisa katleho ea liaparo tsena ho laola tšoaetso ea maqeba 'me, habohlokoa le ho feta, phello ea mefuta ena e matla ea silevera tikolohong ea maqeba le pholiso.
Thutong ena, re bapisitse katleho ea liaparo tse peli tse tsoetseng pele tsa silevera tse nang le liaparo tse tloaelehileng tsa silevera tse hlahisang li-ion tsa Ag1+ khahlanong le li-biofilms tse sebelisang mefuta e fapaneng ea in vitro le in vivo. Hape re ile ra hlahloba phello ea liphahlo tsena tikolohong ea maqeba le pholiso e ikemetseng ea tšoaetso. Ho fokotsa tšusumetso ea matrix a ho fana, liaparo tsohle tsa silevera tse lekiloeng li ne li entsoe ka carboxymethylcellulose.
Tlhahlobo ea rona ea pele ea liaparo tsena tsa silevera khahlanong le li-biofilms tsa bokolone tsa Pseudomonas aeruginosa le Staphylococcus aureus e bontša hore, ho fapana le liaparo tsa setso tsa Ag1+, liaparo tse peli tse tsoetseng pele tsa silevera, Ag1+ + EDTA/BC le letsoai la Ag le oksijene, li sebetsa hantle ho 5. Ho bolaea likokoana-hloko tsa biofilm ka katleho ka hare ho hare ho naha. matsatsi a seng makae. Ho phaella moo, liaparo tsena li thibela ho tsosolosoa ha biofilm ha u pepesehela libaktheria tsa planktonic khafetsa. Moaparo oa Ag1+ o ne o e-na le chloride ea silevera, motsoako oa silevera o tšoanang le matrix a motheo joaloka Ag1+ + EDTA/BC, 'me o bile le phello e fokolang ea ho sebetsa ha baktheria ka har'a biofilm ka nako e tšoanang. Maikutlo a hore moaparo oa Ag1++ EDTA/BC o ne o sebetsa hantle haholo khahlano le biofilm ho feta moaparo oa Ag1+ o nang le matrix a tšoanang le motsoako oa silevera o tšehetsa mohopolo oa hore lisebelisoa tse ling lia hlokahala ho eketsa katleho ea silver chloride khahlano le biofilm, joalo ka ha ho tlalehiloe. libakeng tse ling15. Liphetho tsena li tšehetsa khopolo ea hore BC le EDTA li bapala karolo e eketsehileng e tlatsetsang katlehong ea ho apara ka kakaretso le hore ho ba sieo ha karolo ena ho liaparo tsa Ag1 + ho ka 'na ha tlatsetsa ho hloleheng ho bonts'a katleho ea in vitro. Re fumane hore masela a letsoai a Ag a nang le oksijene a hlahisang Ag2+ le Ag3+ ion a bonts'a katleho e matla ea antibacteria ho feta Ag1+ le maemong a tšoanang le Ag1+ + EDTA/BC. Leha ho le joalo, ka lebaka la bokhoni bo phahameng ba redox, ha ho hlake hore na li-ion tsa Ag3+ li lula li sebetsa ka nako e kae li bile li sebetsa khahlano le li-biofilms tsa maqeba, ka hona li tšoaneloa ke boithuto bo eketsehileng. Ho feta moo, ho na le meseho e mengata e fapaneng e hlahisang li-ion tsa Ag1+ tse sa kang tsa lekoa thutong ena. Liaparo tsena li entsoe ka metsoako e fapaneng ea silevera, likhatiso le matrices a motheo, a ka susumetsang phano ea li-ion tsa Ag1+ le katleho ea tsona khahlano le biofilm. Hape ke habohlokoa ho hlokomela hore ho na le mefuta e mengata e fapaneng ea in vitro le in vivo e sebelisetsoang ho hlahloba katleho ea maqeba a maqeba khahlanong le biofilms. Mofuta oa mohlala o sebelisitsoeng, hammoho le letsoai le protheine ea mecha ea phatlalatso e sebelisoang mefuteng ena, e tla susumetsa katleho ea ho apara. Mohlala oa rona oa in vivo, re ile ra lumella biofilm hore e hōle ka hare ho vitro ebe e e fetisetsa sebakeng sa letlalo la leqeba. Karabelo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung ea toeba e batla e sebetsa khahlano le libaktheria tsa planktonic tse kentsoeng leqebeng, ka hona li etsa biofilm ha leqeba le fola. Ho eketsoa ha biofilm e holileng leqebeng ho fokotsa katleho ea karabelo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung ho sebopeho sa biofilm ka ho lumella biofilm e holileng hore e iketsetse ka har'a leqeba pele pholiso e ka qala. Ka hona, mohlala oa rona o re lumella ho hlahloba katleho ea liaparo tsa likokoana-hloko ho li-biofilms tse hōlileng tsebong pele maqeba a qala ho fola.
Hape re fumane hore ho apara liaparo ho susumelitse katleho ea liaparo tsa silevera ho li-biofilms tse hōlileng ka hare ho vitro le letlalo la nama ea kolobe. Ho kopana haufi le leqeba ho nkoa e le ea bohlokoa bakeng sa katleho ea antimicrobial ea dressing24,25. Liaparo tse nang le letsoai la Ag tse nang le oksijene li ne li amana haufi-ufi le li-biofilms tse hōlileng tsebong, e leng se ileng sa fella ka ho fokotseha ho hoholo ha palo ea libaktheria tse phelang ka har'a biofilm ka mor'a lihora tse 24. Ka lehlakoreng le leng, ha ho phekoloa liphahlo tsa Ag1+ le Ag1++ EDTA/BC, palo e kholo ea libaktheria tse phelang li ile tsa sala. Liaparo tsena li na le li-sutures ka bolelele bohle ba ho apara, e leng se etsang hore ho be le libaka tse shoeleng tse thibelang ho kopana haufi le biofilm. Lithutong tsa rona tsa in vitro, libaka tsena tse sa amaneng le batho li ile tsa thibela ho bolaoa ha libaktheria tse phelang ka har'a biofilm. Re ile ra lekola bokhoni ba baktheria feela kamora lihora tse 24 tsa kalafo; Ha nako e ntse e ea, ha moaparo o ntse o tlala, ho ka 'na ha e-ba le sebaka se fokolang sa ho shoa, ho fokotsa sebaka sa libaktheria tsena tse phelang. Leha ho le joalo, sena se totobatsa bohlokoa ba ho hlophisoa ha moaparo, eseng feela mofuta oa silevera ka ho apara.
Le hoja lithuto tsa in vitro li le molemo bakeng sa ho bapisa katleho ea theknoloji e fapaneng ea silevera, ho bohlokoa hape ho utloisisa liphello tsa liaparo tsena ho li-biofilms tsa vivo, moo lisele tse amohelehang le likarabo tsa 'mele oa ho itšireletsa mafung li tlatsetsang katlehong ea liaparo khahlanong le biofilms. Litholoana tsa liaparo tsena ho li-biofilms tsa maqeba li ile tsa bonoa ho sebelisoa microscope ea elektronike le ho silafatsa ka EPS ea biofilm ho sebelisoa lidae tsa DNA tse ka hare ho lisele le tse ling. Re fumane hore ka mor'a matsatsi a 3 a phekolo, liaparo tsohle li ne li atleha ho fokotsa DNA e se nang lisele ka maqeba a nang le tšoaetso ea biofilm, empa seaparo sa Ag1 + se ne se sa sebetse hantle maqeba a nang le tšoaetso ea Staphylococcus aureus. Ho hlahloba microscopy ea elektronike ho boetse ho bontšitse hore libaktheria tse fokolang haholo li ne li le teng maqebeng a phekoloang ka liaparo tsa silevera, le hoja sena se ne se totobala haholoanyane ka moaparo oa letsoai oa Ag o nang le oksijene le moaparo oa Ag1+ + EDTA/BC ha o bapisoa le moaparo oa Ag1+. Lintlha tsena li bonts'a hore liaparo tsa silevera tse lekiloeng li ne li e-na le tšusumetso e sa tšoaneng mohahong oa biofilm, empa ha ho le e 'ngoe ea liaparo tsa silevera e ileng ea khona ho felisa biofilm, ho tšehetsa tlhokahalo ea mokhoa o feletseng oa ho phekola mafu a likokoana-hloko tsa maqeba; tšebeliso ea mabanta a matsoho a silevera. Kalafo e etelloa pele ke ho senyeha ha 'mele ho tlosa boholo ba biofilm.
Maqeba a sa foleng a atisa ho ba boemong ba ho ruruha ho matla, ho nang le lisele tse feteletseng tsa ho ruruha tse setseng ka har'a lisele tsa leqeba ka nako e telele, tse bakang tšenyo ea lisele le ho senya oksijene e hlokahalang bakeng sa metabolism e sebetsang hantle ea lisele le ho sebetsa leqebeng26. Li-biofilms li mpefatsa tikoloho ena ea maqeba a tletseng bora ka ho ama pholiso hampe ka litsela tse sa tšoaneng, ho kenyeletsa ho thibela ho ata ha lisele le ho falla le ho kenya ts'ebetsong ea li-cytokines tsa proinflammatory27. Ha liaparo tsa silevera li ntse li sebetsa haholoanyane, ke habohlokoa ho utloisisa tšusumetso eo li nang le eona tikolohong ea maqeba le pholiso.
Hoa thahasellisa hore le hoja liaparo tsohle tsa silevera li ile tsa ama sebopeho sa biofilm, liaparo tsa letsoai tsa silevera tse nang le oksijene feela li ile tsa eketsa epithelialization ea maqeba ana a tšoaelitsoeng. Lintlha tsena li tšehetsa liphuputso tsa rona tse fetileng17 le tsa Kalan et al. (2017) 28, e bonts'itseng lintlha tse ntle tsa polokeho le chefo ea letsoai la silevera le oksijene, kaha likhahla tse tlase tsa silevera li ne li sebetsa khahlano le biofilm.
Thuto ea rona ea morao-rao e totobatsa phapang ea theknoloji ea silevera pakeng tsa liaparo tsa silevera tsa antimicrobial le phello ea theknoloji ena tikolohong ea maqeba le pholiso e ikemetseng ea tšoaetso. Leha ho le joalo, liphetho tsena li fapane le liphuputso tse fetileng tse bontšang hore moaparo oa Ag1++ EDTA/BC o ntlafalitse mekhoa ea pholiso ea litsebe tsa mmutla tse lemetseng ka har'a vivo. Leha ho le joalo, sena se ka bakoa ke ho se tšoane ha mefuta ea liphoofolo, linako tsa ho lekanya, le mekhoa ea tšebeliso ea baktheria29. Tabeng ena, litekanyo tsa maqeba li ile tsa nkoa matsatsi a 12 ka mor'a kotsi ho lumella metsoako e sebetsang ea ho apara ho sebetsa ka biofilm ka nako e telele. Sena se tšehetsoa ke phuputso e bontšitseng hore liso tsa maoto tse tšoaelitsoeng ke tleliniki tse phekoloang ka Ag1+ + EDTA/BC qalong li ile tsa eketseha ka boholo ka mor'a beke ea phekolo, 'me libeke tse latelang tsa 3 tsa phekolo ea Ag1+ + EDTA/BC le libeke tse 4 tšebeliso ea li-non-antimicrobials. lithethefatsi. Liaparo tsa CMC ho fokotsa boholo ba liso30.
Mefuta e meng le likhahla tsa silevera li kile tsa bontšoa e le cytotoxic in vitro 11, empa liphello tsena tsa in vitro ha li fetole kamehla liphellong tse mpe tsa vivo. Ho phaella moo, tsoelo-pele ea theknoloji ea silevera le kutloisiso e molemo ea metsoako ea silevera le ho tsepamisa maikutlo ho apara liaparo li lebisitse ho nts'etsopele ea liaparo tse ngata tse sireletsehileng le tse sebetsang tsa silevera. Leha ho le joalo, ha theknoloji ea ho roala silevera e ntse e tsoela pele, ho bohlokoa ho utloisisa phello ea liaparo tsena tikolohong ea maqeba31,32,33. Ho ile ha tlalehoa pele hore tekanyo e ntseng e eketseha ea ho tsosolosoa ha epithelialization e lumellana le karolo e ntseng e eketseha ea li-macrophages tsa M2 tse khahlanong le ho ruruha ha li bapisoa le phenotype ea pro-inflammatory M1. Sena se ile sa hlokomeloa ka mokhoa o fetileng oa mouse moo liaparo tsa maqeba tsa silevera tsa hydrogel li neng li bapisoa le silevera sulfadiazine le li-non-antimicrobial hydrogels34.
Maqeba a sa foleng a ka 'na a bontša ho ruruha ho feteletseng' me ho hlokometsoe hore ho ba teng ha li-neutrophils tse feteletseng ho ka ba kotsi ho folisa maqeba35. Phuputsong ea litoeba tse nang le neutrophil-depleted, boteng ba li-neutrophils bo liehile ho reepithelialization. Ho ba teng ha li-neutrophils tse feteletseng ho lebisa maemong a phahameng a protease le mefuta e mengata ea oksijene e sebetsang, e kang superoxide le hydrogen peroxide, e amanang le maqeba a sa foleng le a liehang ho fola37,38. Ka ho tšoanang, keketseho ea lipalo tsa macrophage, haeba e sa laolehe, e ka lebisa ho lieha ho fola ha maqeba39. Keketseho ena ke ea bohlokoa ka ho khetheha haeba macrophages e sa khone ho fetoha ho tloha ho pro-inflammatory phenotype ho ea phenotype ea phenotype, e leng se etsang hore maqeba a hlōlehe ho tsoa karolong ea ho ruruha ea pholiso40. Re hlokometse ho fokotseha ha li-neutrophils le macrophages maqeba a nang le tšoaetso ea biofilm ka mor'a matsatsi a 3 a phekolo ka liaparo tsohle tsa silevera, empa ho fokotseha ho ile ha bonahala haholoanyane ka liaparo tsa letsoai tse nang le oksijene. Phokotso ena e ka 'na ea e-ba phello e tobileng ea karabelo ea' mele ea ho itšireletsa mafung ho silevera, karabelo ea ho fokotseha ha bioburden, kapa leqeba le le boemong ba morao-rao ba pholiso 'me kahoo lisele tsa' mele tsa ho itšireletsa mafung leqebeng li fokotsehile. Ho fokotsa palo ea lisele tsa ho ruruha leqeba ho ka boloka tikoloho e loketseng ho folisa maqeba. Mokhoa oa ts'ebetso ea hore na Ag oxysalts e khothalletsa pholiso e ikemetseng ea tšoaetso ha e hlake, empa bokhoni ba Ag oxysalts ho hlahisa oksijene le ho senya maemo a kotsi a hydrogen peroxide, mokena-lipakeng oa ho ruruha, a ka hlalosa sena mme a hloka thuto e eketsehileng17.
Maqeba a tšoaelitsoeng a sa foleng a sa foleng a baka bothata ho lingaka le bakuli. Le hoja liaparo tse ngata li bolela hore li na le matla a ho thibela likokoana-hloko, liphuputso ha se hangata li shebaneng le lintlha tse ling tsa bohlokoa tse susumetsang tikoloho ea leqeba. Phuputso ena e bontša hore mekhoa e fapaneng ea theknoloji ea silevera e na le katleho e fapaneng ea likokoana-hloko 'me, habohlokoa, liphello tse fapaneng tikolohong ea leqeba le pholiso, ntle le tšoaetso. Le hoja liphuputso tsena tsa in vitro le in vivo li bontša katleho ea liaparo tsena ho phekola tšoaetso ea maqeba le ho khothalletsa pholiso, liteko tse laoloang ka mokhoa o sa reroang lia hlokahala ho hlahloba katleho ea liaparo tsena tleliniking.
Lintlha tse sebelisitsoeng le/kapa tse hlahlobiloeng nakong ea thuto ea hajoale li fumaneha ho tsoa ho sengoli se tsamaisanang le sona ka kopo e utloahalang.
Nako ea poso: Jul-15-2024