Kea leboha ha le etetse Nature.com. Mofuta wa sebatli seo o se sebedisang o na le tshehetso e fokolang ya CSS. Bakeng sa diphetho tse ntle ka ho fetisisa, re kgothaletsa hore o sebedise mofuta o motjha wa sebatli sa hao (kapa o tima Mokgwa wa ho Kopana ho Internet Explorer). Ho sa le jwalo, ho netefatsa tshehetso e tswelang pele, re bontsha sebaka sena sa marang-rang ntle le setaele kapa JavaScript.
Ho hola ha dikokwana-hloko maqebeng hangata ho iponahatsa e le di-biofilms, tse sitisang pholiso mme ho thata ho di fedisa. Di-dressing tse ntjha tsa silevera di bolela hore di lwantsha ditshwaetso tsa maqeba, empa katleho ya tsona ya antibiofilm le ditlamorao tsa pholiso tse sa itshetlehang ho tshwaetso ha di tsejwe ka kakaretso. Re sebedisa mehlala ya in vitro le in vivo ya Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa, re tlaleha katleho ya di-dressing tse hlahisang ion tsa Ag1+; di-dressing tsa Ag1+ tse nang le ethylenediaminetetraacetic acid le benzethonium chloride (Ag1+/EDTA/BC), le di-dressing tse nang le nitrate ya silevera (Ag oxysalts). , tse hlahisang di-ion tsa Ag1+, Ag2+ le Ag3+ ho lwantsha biofilm ya maqeba le phello ya yona pholisong. Di-dressing tsa Ag1+ di bile le ditlamorao tse fokolang ho biofilm ya maqeba in vitro le ho ditoeba (C57BL/6j). Ka lehlakoreng le leng, matswai a Ag a nang le oksijene le di-dressing tsa Ag1+/EDTA/BC di fokoditse haholo palo ya dibaktheria tse phelang ka hara biofilms ka hara vitro mme di bontshitse phokotso e kgolo dikarolong tsa baktheria le tsa EPS ka hara biofilms tsa maqeba a toeba. Di-dressing tsena di bile le ditlamorao tse fapaneng pholisong ya maqeba a tshwaeditsweng ke biofilm le a sa tshwaetswang ke biofilm, ka di-dressing tsa letsoai tse nang le oksijene di nang le ditlamorao tse molemo ho reepithelialization, boholo ba maqeba le ho ruruha ha ho bapiswa le kalafo ya taolo le di-dressing tse ding tsa silevera. Dithoto tse fapaneng tsa fisik'hemik'hale tsa di-dressing tsa silevera di ka ba le ditlamorao tse fapaneng ho biofilm ya maqeba le pholiso, mme sena se lokela ho nahannwa ha ho kgethwa se-dressing bakeng sa kalafo ya maqeba a tshwaeditsweng ke biofilm.
Maqeba a sa foleng a hlalosoa e le "maqeba a hlolehang ho feta mehatong e tloaelehileng ea pholiso ka mokhoa o hlophisehileng le o nakong" 1. Maqeba a sa foleng a baka moroalo oa kelello, oa sechaba le oa moruo bakeng sa bakuli le tsamaiso ea tlhokomelo ea bophelo. Tšebeliso ea selemo le selemo ea NHS ho phekoleng maqeba le mafu a amanang le 'ona e hakanngoa ho £8.3 bilione ka 2017-182. Maqeba a sa foleng le 'ona hona joale ke bothata bo boholo United States, moo Medicare e hakanyang litšenyehelo tsa selemo le selemo tsa ho phekola bakuli ba nang le maqeba ho $28.1–$96.8 bilione3.
Tšoaetso ke ntlha e kholo e thibelang pholiso ea maqeba. Hangata tšoaetso e iponahatsa e le li-biofilms, tse teng ho 78% ea maqeba a sa foleng a sa foleng. Li-biofilms li thehoa ha likokoana-hloko li khomarela ka mokhoa o ke keng oa fetoloa holim'a libaka, joalo ka libaka tsa maqeba, 'me li ka kopana ho theha metse e hlahisang polymer ea kantle ho sele (EPS). Biofilm ea maqeba e amahanngoa le karabelo e eketsehileng ea ho ruruha e lebisang tšenyo ea lisele, e ka liehisang kapa ea thibela pholiso4. Keketseho ea tšenyo ea lisele e ka bakoa ke karolo e itseng ke ts'ebetso e eketsehileng ea matrix metalloproteinases, collagenase, elastase le mefuta ea oksijene e arabelang5. Ho feta moo, lisele tse ruruhang le li-biofilms ka botsona ke bareki ba bangata ba oksijene 'me ka hona li ka baka hypoxia ea lisele tsa lehae, tsa fokotsa lisele tsa oksijene ea bohlokoa e hlokahalang bakeng sa tokiso e sebetsang ea lisele6.
Li-biofilm tse hōlileng tsebong li hanela haholo li-antimicrobial agents, li hloka maano a matla a ho laola tšoaetso ea biofilm, joalo ka kalafo ea mechini e lateloang ke kalafo e atlehang ea antimicrobial. Hobane li-biofilm li ka ikatisa ka potlako, li-antimicrobial tse sebetsang li ka fokotsa kotsi ea ho boptjoa hape kamora ho tlosoa ha opereishene7.
Silevera e ntse e sebelisoa haholo liphahlong tsa likokoana-hloko 'me hangata e sebelisoa e le kalafo ea pele bakeng sa maqeba a sa foleng a tšoaelitsoeng. Ho na le liphahlo tse ngata tsa silevera tse rekisoang khoebong, e 'ngoe le e 'ngoe e na le sebopeho se fapaneng sa silevera, mahloriso le motheo oa motheo. Tsoelo-pele liphahlong tsa silevera e lebisitse nts'etsopele ea liphahlo tse ncha tsa silevera. Sebopeho sa tšepe sa silevera (Ag0) ha se sebetse; Ho fihlela katleho ea likokoana-hloko, e tlameha ho lahleheloa ke elektrone ho etsa silevera ea ionic (Ag1+). Liphahlong tsa silevera tsa setso li na le metsoako ea silevera kapa silevera ea tšepe eo, ha e pepesetsoa metsi, e bolang ho etsa li-ion tsa Ag1+. Li-ion tsena tsa Ag1+ li arabela le sele ea baktheria, li tlosa lielektrone likarolong tsa sebopeho kapa lits'ebetsong tsa bohlokoa tse hlokahalang bakeng sa ho phela. Theknoloji e nang le patente e lebisitse nts'etsopele ea motsoako o mocha oa silevera, Ag oxysalts (silver nitrate, Ag7NO11), e kenyelelitsoeng liphahlong tsa maqeba. Ho fapana le silevera ea setso, ho bola ha letsoai le nang le oksijene ho hlahisa maemo a silevera a nang le valence e phahameng (Ag1+, Ag2+ le Ag3+). Lithuto tsa in vitro li bontšitse hore mahloriso a tlase a letsoai la silevera le nang le oksijene a sebetsa hantle ho feta silevera e le 'ngoe (Ag1+) khahlanong le libaktheria tse bakang mafu tse kang Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus le Escherichia coli8,9. Mofuta o mong o mocha oa ho roala silevera o kenyelletsa metsoako e meng, e leng ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) le benzethonium chloride (BC), tse tlalehiloeng li shebane le biofilm EPS 'me ka hona li eketsa ho kenella ha silevera ka har'a biofilm. Mahlale ana a macha a silevera a fana ka litsela tse ncha tsa ho shebana le biofilm ea maqeba. Leha ho le joalo, tšusumetso ea meriana ena e bolaeang likokoana-hloko tikolohong ea maqeba le pholiso e sa itšetleheng ka tšoaetso ke ea bohlokoa ho netefatsa hore ha e bake tikoloho e mpe ea maqeba kapa ho lieha pholiso. Matšoenyeho mabapi le chefo ea silevera ea in vitro a tlalehiloe ka li-dressing tse 'maloa tsa silevera10,11. Leha ho le joalo, chefo ea in vitro ha e so fetoleloe chefo ea in vivo, 'me li-dressing tse 'maloa tsa Ag1+ li bontšitse boemo bo botle ba polokeho12.
Mona, re batlisisitse katleho ea li-dressing tsa carboxymethylcellulose tse nang le li-formulations tse ncha tsa silevera khahlanong le biofilm ea maqeba ka har'a vitro le ka har'a 'mele. Ho phaella moo, liphello tsa li-dressing tsena likarabelong tsa 'mele oa ho itšireletsa mafung le pholisong ho sa tsotelehe tšoaetso li ile tsa hlahlojoa.
Ditlolo tsohle tse sebedisitsweng di ne di fumaneha kgwebong. 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, UK) ke dressing ya gel fiber ya 100% carboxymethylcellulose (CMC) e seng ya dikokwana-hloko e ileng ya sebediswa e le dressing ya taolo thutong ena. Ditlolo tse tharo tsa silevera tsa CMC tse thibelang dikokwana-hloko di ile tsa lekolwa, e leng dressing ya 3M Kerracel Ag (3M, Knutsford, UK), e nang le 1.7 wt%. letswai la silevera le nang le oksijene (Ag7NO11) ka hara di-ion tse phahameng tsa silevera tsa valence (Ag1+, Ag2+ le Ag3+). Nakong ya ho bola ha Ag7NO11, di-ion tsa Ag1+, Ag2+ le Ag3+ di bopjwa ka karolelano ya 1:2:4. Seaparo se eketsehileng sa Aquacel Ag se nang le 1.2% ea chloride ea silevera (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, UK) 13 le Seaparo se eketsehileng sa Aquacel Ag + se nang le 1.2% ea chloride ea silevera (Ag1+), EDTA le benzethonium chloride (ConvaTec, Deeside, UK) 14.
Mefuta e sebedisitsweng thutong ena e ne e le Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) le Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
Baktheria e ile ea holisoa bosiu bohle ka moro oa Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, UK). Semela sa bosiu kaofela se ile sa tšeloa ka 1:100 ka moro oa Mueller-Hinton le 200 µl tse koahetsoeng holim'a li-membrane tsa 0.2 µm tsa Whatman cyclopore (Whatman plc, Maidstone, UK) holim'a lipoleiti tsa Mueller-Hinton agar (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Great Britain). ) Sebopeho sa biofilm ea bokolone ka mocheso oa 37°C ka lihora tse 24. Biofilms tsena tsa bokolone li ile tsa lekoa bakeng sa ho fokotseha ha logarithmic.
Seha seaparo ka likotoana tse 3 cm2 'me u se kolobise ka metsi a hloekisitsoeng a hloekisitsoeng. Beha lesela holim'a biofilm ea kolone poleiting ea agar. Lihekthere tse ling le tse ling tse 24 tsa biofilm li ile tsa tlosoa, 'me libaktheria tse phelang ka har'a biofilm (CFU/ml) li ile tsa lekanngoa ka ho qhibiliha ka serial (10−1 ho isa ho 10−7) ka moro oa Day-Angle neutralization (Merck-Millipore). Kamora lihora tse 24 tsa ho ikatisa ka mocheso oa 37°C, lipalo tse tloaelehileng tsa lipoleiti li ile tsa etsoa lipoleiting tsa agar tsa Mueller-Hinton. Kalafo ka 'ngoe le nako li ile tsa etsoa ka makhetlo a mararo, 'me lipalo tsa lipoleiti li ile tsa phetoa bakeng sa ho qhibiliha ka 'ngoe.
Letlalo la mpa la kolobe le fumanoa ho dikolobe tse tshehadi tse kgolo tse tshweu metsotsong e 15 kamora ho hlajwa ho ya ka maemo a European Union a kantle ho naha. Letlalo le ile la beolwa mme la hlwekiswa ka di-wipes tsa jwala, mme la hoamiswa ho -80°C ka dihora tse 24 ho ntsha matla letlalong. Kamora ho qhibidiha, dikotwana tsa letlalo tsa 1 cm2 di ile tsa hlatsuwa hararo ka PBS, 0.6% sodium hypochlorite, le 70% ethanol metsotso e 20 nako le nako. Pele o tlosa epidermis, tlosa ethanol efe kapa efe e setseng ka ho hlatswa ka makgetlo a 3 ka PBS e hlwekileng. Letlalo le ile la hodiswa ka poleiting ya di-well tse 6 ka lera la nylon le teteaneng la 0.45-μm (Merck-Millipore) ka hodimo le di-pad tse 3 tse monyang (Merck-Millipore) tse nang le 3 ml fetal bovine serum (Sigma) e tlatselletswang ka 10% Dulbecco's modified Eagle. Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium – Aldrich Ltd.).
Li-biofilm tsa bokolone li ile tsa lengoa joalo ka ha ho hlalositsoe bakeng sa lithuto tsa ho pepesehela biofilm. Kamora ho lema biofilm holim'a lera ka lihora tse 72, biofilm e ile ea sebelisoa holim'a letlalo ka ho sebelisa sekotjana sa ente e hloekileng 'me lera la tlosoa. Biofilm e ile ea kenngoa holim'a dermis ea kolobe ka lihora tse ling tse 24 mochesong oa 37°C ho lumella biofilm ho hola le ho khomarela letlalo la kolobe. Kamora hore biofilm e hole le ho hokeloa, setlolo sa 1.5 cm2, se kolobisitsoeng esale pele ka metsi a hloekisitsoeng a hloekileng, se ile sa sebelisoa ka ho toba holim'a letlalo 'me sa kenngoa mochesong oa 37°C ka lihora tse 24. Libaktheria tse phelang li ile tsa bonoa ka ho daea ka ho sebelisa PrestoBlue cell viability reagent (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, UK) ka mokhoa o ts'oanang holim'a apical ea explant ka 'ngoe le ho e kenya metsing ka metsotso e 5. Sebelisa khamera ea dijithale ea Leica DFC425 ho hapa litšoantšo hang-hang ho microscope ea Leica MZ8. Libaka tse mmala o pinki li ile tsa lekanngoa ho sebelisoa software ea Image Pro version 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)). Ho skena microscopy ea elektrone ho entsoe joalo ka ha ho hlalositsoe ka tlase.
Libaktheria tse holisitsoeng bosiu kaofela li ile tsa hlapolloa ka 1:100 ka moro oa Mueller-Hinton. 200 μl ea setso e ile ea eketsoa ka har'a membrane ea cyclopore ea Whatman e se nang mafura ea 0.2 μm (Whatman, Maidstone, UK) 'me ea manehoa holim'a agar ea Mueller-Hinton. Lipoleiti tsa biofilm li ile tsa beoa mochesong oa 37°C ka lihora tse 72 ho lumella ho thehoa ha biofilm e butsoitseng.
Kamora matsatsi a 3 a ho hola ha biofilm, bandeji ya disekwere tse 3 cm2 e ile ya bewa ka ho toba hodima biofilm mme ya bewa mochesong wa 37°C ka dihora tse 24. Kamora ho tlosa bandeji hodima bokahodimo ba biofilm, 1 ml ya PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA) e ile ya eketswa hodima bokahodimo ba biofilm ka nngwe ka metsotswana e 20. Bokahodimo bo ile ba omiswa pele diphetoho tsa mmala di rekotwa ho sebediswa khamera ya dijithale ya Nikon D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, UK).
Lokisetsa dimela tsa bosiu kaofela ka agar ya Mueller-Hinton, fetisetsa dikolone ka bomong ho moro wa Mueller-Hinton wa 10 ml mme o di fuame ka shaker ka mocheso wa 37°C (100 rpm). Kamora ho fuame bosiu bohle, dimela di ile tsa hlapollwa ka 1:100 ka moro wa Mueller-Hinton mme 300 µl ya bonwa hodima membrane ya cyclopore ya Whatman e chitja ya 0.2 µm (Whatman International, Maidstone, UK) ho agar ya Mueller-Hinton mme tsa fuametswa ka mocheso wa 37°C nakong ya dihora tse 72. . Biofilm e hodileng e ile ya tlotswa leqebeng jwalo ka ha ho hlalositswe ka tlase.
Mosebetsi oohle le liphoofolo o entsoe Univesithing ea Manchester tlas'a laesense ea projeke e amohetsoeng ke Ofisi ea Boiketlo ba Liphoofolo le Tlhahlobo ea Boitšoaro (P8721BD27) le ho latela litataiso tse phatlalalitsoeng ke Ofisi ea Lehae tlas'a ASPA e ntlafalitsoeng ea 2012. Bangoli bohle ba latetse litataiso tsa ho fihla. Litoeba tsa C57BL/6j tse nang le libeke tse robeli (Envigo, Oxon, UK) li sebelisitsoe bakeng sa lithuto tsohle tsa in vivo. Litoeba li ile tsa robatsoa ka isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK) 'me bokaholimo ba tsona ba mokokotlo ba beoloa le ho hloekisoa. Toeba ka 'ngoe e ile ea fuoa leqeba la 2 × 6 mm la ho tlosoa ha leqeba ho sebelisoa Stiefel biopsy punch (Schuco International, Hertfordshire, UK). Bakeng sa maqeba a tšoaelitsoeng ke biofilm, sebelisa biofilm ea colonial ea lihora tse 72 e holisitsoeng holim'a lera la letlalo joalokaha ho hlalositsoe ka holimo lera la letlalo la leqeba u sebelisa sekotjana sa ente e hloekileng hang ka mor'a kotsi 'me u lahle lera. Sekwere sa sentimetara se le seng sa ho roala se kolobisoa esale pele ka metsi a hloekileng ho boloka tikoloho ea leqeba e le mongobo. Li-dressing li ile tsa sebelisoa ka ho toba leqebeng ka leng 'me tsa koaheloa ka filimi ea 3M Tegaderm (3M, Bracknell, UK) le sekhomaretsi sa metsi sa Mastisol (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) se sebelisitsoeng ho potoloha mathōko ho fana ka ho khomarela ho eketsehileng. Buprenorphine (Animalcare, York, UK) e ile ea fuoa ka tekanyo ea 0.1 mg/kg e le moriana o kokobetsang bohloko. Hahola litoeba matsatsi a mararo kamora kotsi u sebelisa mokhoa oa Kemiso ea 1 'me u tlose, u arole ka halofo,' me u boloke sebaka sa leqeba ha ho hlokahala.
Ho daea ka Hematoxylin (ThermoFisher Scientific) le eosin (ThermoFisher Scientific) ho entsoe ho latela mokhoa oa moetsi. Sebaka sa leqeba le ho khutlisetsoa ha leqeba ho ile ha lekanngoa ho sebelisoa software ea Image Pro version 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Likarolo tsa dinama di ile tsa hlatsuwa ka hara xylene (ThermoFisher Scientific, Loughborough, UK), tsa tshelwa metsi hape ka ethanol e nang le maemo a 100–50%, mme tsa qoelisoa ka bokgutshwane metsing a qhibilihisitsweng (ThermoFisher Scientific). Immunohistochemistry e entswe ka ho sebedisa VectaStain Elite ABC PK-6104 kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) ho ya ka protocol ya moetsi. Di-antibodies tsa mantlha ho di-neutrophils NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) le macrophages Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) di ile tsa hlatsuwa ka 1:100 ka hara tharollo e thibelang mme tsa eketswa hodima bokahodimo bo sehilweng, mme tsa latelwa ke di-antibodies tse 2 tsa Anti-, VectaStain ABC le Vector Nova Red Peroxidase (HRP) substrate kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) mme tsa tshwarwa ka hematoxylin. Litšoantšo li fumanoe ka ho sebelisa microscope ea Olympus BX43 le khamera ea dijithale ea Olympus DP73 (Olympus, Southend-on-Sea, UK).
Disampole tsa letlalo di ile tsa lokiswa ka 2.5% glutaraldehyde le 4% formaldehyde ka 0.1 M HEPES (pH 7.4) ka dihora tse 24 ho 4°C. Disampole di ile tsa ntshuwa metsi ka ho sebedisa ethanol e nang le maemo mme tsa omiswa ka CO2 ho sebediswa Quorum K850 critical point dryer (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK) mme tsa manehwa ka motswako wa gold-palladium ho sebediswa sistimi ya Quorum SC7620 mini sputterer/glow discharge. Disampole di ile tsa nkuwa setshwantsho ho sebediswa microscope ya electron ya FEI Quanta 250 scanning (ThermoFisher Scientific) ho bona ntlha e bohareng ya leqeba.
Toto-1 iodide (2 μM) e ile ea sebelisoa holim'a leqeba la toeba le ntšitsoeng 'me ea bolokoa metsotso e 5 mochesong oa 37 °C (ThermoFisher Scientific) 'me ea phekoloa ka Syto-60 (10 μM) mochesong oa 37 °C (ThermoFisher Scientific). Litšoantšo tsa Z-stack tsa metsotso e 15 li entsoe ho sebelisoa Leica TCS SP8.
Lintlha tse ikatisang tsa baeloji le tsa botekgeniki li ile tsa hlophisoa le ho hlahlojoa ho sebelisoa software ea Graphpad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). Tlhahlobo ea phapang ea tsela e le 'ngoe ka lipapiso tse ngata ho sebelisoa teko ea post hoc ea Dunnett e sebelisitsoe ho leka liphapang lipakeng tsa kalafo ka 'ngoe le seaparo sa taolo se seng sa likokoana-hloko. Boleng ba p <0.05 bo ne bo nkoa bo le bohlokoa.
Katleho ea li-dressing tsa gel ea silevera e ile ea hlahlojoa pele khahlanong le likolone tsa biofilm tsa Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa in vitro. Li-dressing tsa silevera li na le mekhoa e fapaneng ea silevera: li-dressing tsa silevera tsa setso li hlahisa li-ion tsa Ag1+; li-dressing tsa silevera, tse ka hlahisang li-ion tsa Ag1+ kamora ho eketsoa ha EDTA/BC, li ka senya matrix ea biofilm 'me tsa pepesetsa libaktheria sileverang tlas'a phello ea antibacterial ea li-ion tsa silevera. li-ion15 le li-dressing tse nang le letsoai la Ag le oksijene tse hlahisang li-ion tsa Ag1+, Ag2+ le Ag3+. Katleho ea eona e ile ea bapisoa le setlolo sa taolo se seng sa antimicrobial se entsoeng ka likhoele tse nang le gelled. Libaktheria tse setseng tse phelang ka har'a biofilm li ile tsa hlahlojoa lihora tse ling le tse ling tse 24 ka matsatsi a 8 (Setšoantšo sa 1). Letsatsing la 5, biofilm e ile ea khutlisetsoa hape ka 3.85 × 105S. Staphylococcus aureus kapa 1.22 × 105P. aeruginosa ho lekola pholiso ea biofilm. Ha ho bapisoa le dikobo tse sa laoleheng tse sa thibeleng dikobo, dikobo tse nang le Ag1+ di bile le phello e fokolang hodima bokgoni ba ho phela ba baktheria ho Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa biofilms ka matsatsi a 5. Ka lehlakoreng le leng, dikobo tse nang le Ag le Ag1+ + EDTA/BC tse nang le oksijene di ne di sebetsa hantle ho bolayeng dikobo tse ka hara biofilm matsatsing a 5. Kamora ho entoa kgafetsa ka dikobo tse nang le planktonic ka letsatsi la 5, ha ho a ka ha bonwa tsosoloso ya biofilm (Setshwantsho sa 1).
Tekanyo ea libaktheria tse phelang ho Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa biofilms kamora kalafo ka li-dressing tsa silevera. Likolone tsa biofilm tsa Staphylococcus aureus le Pseudomonas aeruginosa li ile tsa phekoloa ka li-dressing tsa silevera kapa li-dressing tse sa thibeleng likokoana-hloko, 'me palo ea libaktheria tse phelang tse setseng e ile ea fumanoa lihora tse ling le tse ling tse 24. Kamora matsatsi a 5, biofilm e ile ea khutlisetsoa ka 3.85×105S. Staphylococcus aureus kapa 1.22×105P. Likolone tsa bacterioplankton Pseudomonas aeruginosa li ile tsa thehoa ka bonngoe ho lekola pholiso ea biofilm. Ligrafe li bontša phoso e tloaelehileng ea +/-.
Ho bona phello ea litlolo tsa silevera ho pheleng ha biofilm, litlolo li ile tsa sebelisoa ho biofilms tse hōlileng tse holileng letlalong la kolobe ex vivo. Kamora lihora tse 24, seaparo sea tlosoa 'me biofilm e daetsoa ka dae e putsoa e arabelang, e fetoloang ke libaktheria tse phelang ho ba 'mala o pinki. Biofilms tse phekoloang ka litlolo tsa taolo li ne li le pinki, e leng se bontšang boteng ba libaktheria tse phelang ka har'a biofilm (Setšoantšo sa 2A). Ka lehlakoreng le leng, biofilm e phekoloang ka seaparo sa Ag oxysols e ne e le putsoa haholo-holo, e leng se bontšang hore libaktheria tse setseng holim'a letlalo la kolobe e ne e le libaktheria tse sa pheleng (Setšoantšo sa 2B). 'Mala o tsoakiloeng oa boputsoa le pinki o ile oa bonoa ho biofilms tse phekoloang ka litlolo tse nang le Ag1+, e leng se bontšang boteng ba libaktheria tse phelang le tse sa pheleng ka har'a biofilm (Setšoantšo sa 2C), athe liaparo tsa EDTA/BC tse nang le Ag1+ li ne li le putsoa haholo-holo ka matheba a mang a pinki, tse bontšang libaka tse sa angoang ke seaparo sa silevera (Setšoantšo sa 2D). Palo ea libaka tse sebetsang (pinki) le tse sa sebetseng (putsoa) e bontšitse hore patch ea taolo e ne e sebetsa ka 75% (Setšoantšo sa 2E). Liaparo tsa Ag1+ + EDTA/BC li entsoe ka tsela e tšoanang le tsa Ag tse nang le oksijene, ka sekhahla sa ho pholoha sa 13% le 14%, ka ho latellana. Liaparo tsa Ag1+ le tsona li fokolitse matla a baktheria ka 21%. Li-biofilm tsena li ile tsa bonoa ka ho sebelisa microscopy ea electron scanning (SEM). Kamora kalafo ka dressing ea taolo le dressing ea Ag1+, lera la Pseudomonas aeruginosa le ile la bonoa le koahela letlalo la kolobe (Setšoantšo sa 2F,H), athe kamora kalafo ka dressing ea Ag1+, ho ile ha fumanoa lisele tse fokolang tsa baktheria 'me ho fumanoe lisele tse fokolang tsa baktheria ka tlas'a lona. Likhoele tsa Collagen li ka nkoa e le sebopeho sa lisele tsa letlalo la kolobe (Setšoantšo sa 2G). Kamora kalafo ka dressing ea Ag1+ + EDTA/BC, li-plaque tsa baktheria le li-plaque tsa collagen fiber tse ka tlase li ile tsa bonahala (Setšoantšo sa 2I).
Pono ea Pseudomonas aeruginosa biofilm ka mor'a kalafo ea silika ea silevera. (A–D) Ho phela hantle ha baktheria ho Pseudomonas aeruginosa biofilms tse holisitsoeng letlalong la kolobe ho bonoe ka ho sebelisa dae ea PrestoBlue viability lihora tse 24 kamora kalafo ka silika ea silevera kapa silika ea taolo e seng ea likokoana-hloko. Libaktheria tse phelang li pinki, libaktheria tse sa pheleng 'me letlalo la kolobe le leputsoa. (E) Tekanyo ea Pseudomonas aeruginosa biofilms tse holisitsoeng letlalong la kolobe (letheba le pinki) ho sebelisoa microscopy ea elektronike e skena Image Pro version 10 (FI) 'me e phekoloa ka silika ea silevera kapa silika ea taolo e seng ea likokoana-hloko lihora tse 24. SEM scale bar = 5 µm. (J–M) Li-biofilms tsa bokolone li holile holim'a li-filters 'me li ne li daelitsoe ka dae e arabelang ea PrestoBlue kamora lihora tse 24 tsa ho ikatisa ka silika ea silevera.
Ho fumana hore na ho kopana haufi-ufi pakeng tsa di-dressing le di-biofilm ho amme katleho ya di-dressing, di-biofilm tsa bokolone tse behilweng hodima sebaka se bataletseng di ile tsa phekolwa ka di-dressing ka dihora tse 24 mme tsa tlotswa ka didae tse arabelang. Biofilm e sa phekolwang e ne e le pinki e lefifi ka mmala (Setshwantsho sa 2J). Ho fapana le di-biofilm tse phekolwang ka di-dressing tse nang le matswai a Ag a nang le oksijene (Setshwantsho sa 2K), di-biofilm tse phekolwang ka di-dressing tse nang le Ag1+ kapa Ag1+ + EDTA/BC di bontshitse meqhaka ya mmala o pinki (Setshwantsho sa 2L,M). Mmala ona o pinki o bontsha boteng ba dibaktheria tse phelang mme o amana le sebaka sa suture ka hara setlolo. Dibaka tsena tse rokelletsweng di etsa dibaka tse shweleng tse dumellang dibaktheria ka hara biofilm ho phela.
Ho lekola katleho ea li-dressing tsa silevera ka har'a 'mele, maqeba a teteaneng a litoeba a tšoaelitsoeng ke li-biofilms tse hōlileng tsa S. aureus le P. aeruginosa a ile a phekoloa ka li-dressing tsa taolo tse seng tsa antimicrobial kapa li-dressing tsa silevera. Kamora matsatsi a 3 a kalafo, tlhahlobo ea setšoantšo sa macroscopic e bontšitse boholo bo bonyenyane ba maqeba ha a phekoloa ka li-dressing tsa letsoai tse nang le oksijene ha li bapisoa le li-dressing tsa taolo tse seng tsa antimicrobial le li-dressing tse ling tsa silevera (Setšoantšo sa 3A-H). Ho netefatsa lintho tsena tse hlokometsoeng, maqeba a ile a kotuloa 'me sebaka sa maqeba le reepithelialization li ile tsa lekanngoa likarolong tsa hematoxylin le tsa eosin tse silafalitsoeng ke lisele ho sebelisoa image pro software version 10 (Setšoantšo sa 3I-L).
Tšusumetso ea li-dressing tsa silevera holim'a leqeba le ho nchafatsa maqeba a tšoaelitsoeng ke biofilms. (A–H) Lisele tse nyane tse tšoaelitsoeng ke biofilms tsa Pseudomonas aeruginosa (A–D) le Staphylococcus aureus (E–H) kamora matsatsi a mararo a kalafo ka dressing e sa thibeleng likokoana-hloko, dressing ea letsoai la Ag e nang le oksijene, dressing ea Ag1+, le dressing ea Ag1+. Litšoantšo tse emelang macroscopic. maqeba a litoeba a nang le dressing ea Ag1+ + EDTA/BC. (IL) Tšoaetso ea Pseudomonas aeruginosa e emelang, likarolo tsa histological tse nang le hematoxylin le eosin, tse sebelisetsoang ho lekanya sebaka sa leqeba le tsosoloso ea epithelial. Tekanyo ea sebaka sa leqeba (M, O) le peresente ea reepithelialization (N, P) ea maqeba a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa (M, N) le Staphylococcus aureus (O, P) biofilms (ka sehlopha sa kalafo n = 12). Ligrafe li bontša phoso e tloaelehileng ea +/-. * e bolela p = < 0.05 ** e bolela p = < 0.01; Sekala sa macroscopic = 2.5 mm, sekala sa histological = 500 µm.
Tekanyo ea sebaka sa leqeba maqebeng a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa biofilm (Setšoantšo sa 3M) se bontšitse hore maqeba a phekoloang ka Ag oxysalts a ne a e-na le boholo ba leqeba bo tloaelehileng ba 2.5 mm2, ha lesela la taolo le seng la antimicrobial le ne le e-na le boholo ba leqeba bo tloaelehileng ba 3.1 mm2, e leng se seng 'nete. le fihlile bohlokoa ba lipalo-palo (Setšoantšo sa 3M). p = 0.423). Maqeba a phekoloang ka Ag1+ kapa Ag1+ + EDTA/BC ha aa ka a bontša phokotso sebakeng sa leqeba (3.1 mm2 le 3.6 mm2, ka ho latellana). Kalafo ka lesela la letsoai la Ag le nang le oksijene e khothalelitse ho nchafatsa letlalo ka tekanyo e kholo ho feta lesela la taolo le seng la antimicrobial (34% le 15%, ka ho latellana; p = 0.029) le Ag1+ kapa Ag1+ + EDTA/BC (10% le 11%) (Setšoantšo sa 3N). . , ka ho latellana).
Mekhoa e tšoanang sebakeng sa leqeba le tsosoloso ea epithelial e bonoe maqebeng a tšoaelitsoeng ke S. aureus biofilms (Setšoantšo sa 3O). Li-dressings tse nang le letsoai la silevera le nang le oksijene li fokolitse sebaka sa leqeba (2.0 mm2) ka 23% ha li bapisoa le dressing ea taolo e seng ea antimicrobial (2.6 mm2), leha phokotso ena e ne e se ea bohlokoa (p = 0.304) (Setšoantšo sa 3O). Ho phaella moo, sebaka sa leqeba sehlopheng sa kalafo ea Ag1+ se fokotsehile hanyane (2.4 mm2), ha leqeba le phekoloang ka dressing ea Ag1+ + EDTA/BC le sa fokotsa sebaka sa leqeba (2.9 mm2). Matsoai a oksijene a Ag le ona a khothalelitse ho nchafatsoa ha maqeba a tšoaelitsoeng ke S. aureus biofilm (31%) ka tekanyo e kholo ho feta a phekoloang ka dressing ea taolo e seng ea antimicrobial (12%, p = 0.003) (Setšoantšo sa 3P). Ho apesa ka Ag1+ (16%, p = 0.903) le ho apesa ka Ag+1 + EDTA/BC (14%, p = 0.965) ho bontshitse maemo a ho tsosolosoa ha epithelial a tshwanang le taolo.
Ho bona phello ea litlolo tsa silevera holim'a matrix ea biofilm, ho entsoe ho taka Toto 1 le Syto 60 iodide (Setšoantšo sa 4). Toto 1 iodide ke dae e kenelletseng ka seleng e ka sebelisoang ho bona ka nepo li-nucleic acid tsa kantle ho sele, tse ngata ho EPS ea biofilms. Syto 60 ke dae e kenelletseng ka seleng e sebelisoang e le counterstain16. Litebello tsa Toto 1 le Syto 60 iodide maqebeng a kentsoeng ka biofilms tsa Pseudomonas aeruginosa (Setšoantšo sa 4A-D) le Staphylococcus aureus (Setšoantšo sa 4I-L) li bontšitse hore kamora matsatsi a 3 a kalafo ea litlolo, EPS ka biofilm e fokotsehile haholo. e nang le letsoai le nang le oksijene Ag le Ag1+ + EDTA/BC. Li-dressing tsa Ag1+ tse se nang likarolo tse ling tsa antibiofilm li fokolitse haholo DNA e se nang lisele maqebeng a entetsoeng ka Pseudomonas aeruginosa empa li ne li sa sebetse hantle maqebeng a entetsoeng ka Staphylococcus aureus.
Litšoantšo tsa biofilm ea maqeba a ka hare ho 'mele ka mor'a matsatsi a 3 a kalafo ka li-dressing tsa taolo kapa tsa silevera. Litšoantšo tsa confocal tsa Pseudomonas aeruginosa (A–D) le Staphylococcus aureus (I–L) tse pentiloeng ka Toto 1 (e tala) ho bona li-nucleic acid tsa kantle ho sele, e leng karolo ea li-polymers tsa biofilm tsa kantle ho sele. Ho daea li-nucleic acid tsa ka hare ho sele, sebelisa li-acid tsa Syto 60 (e khubelu). P. Ho skena microscopy ea elektrone ea maqeba a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa (E–H) le Staphylococcus aureus (M–P) kamora matsatsi a 3 a kalafo ka li-dressing tsa taolo le silevera. Sekala sa SEM bar = 5 µm. Sekala sa confocal imaging bar = 50 µm.
Ho hlahloba microscopy ea elektronike ho bontšitse hore litoeba tse entetsoeng ka likolone tsa biofilm tsa Pseudomonas aeruginosa (Setšoantšo sa 4E-H) le Staphylococcus aureus (Setšoantšo sa 4M-P) li ne li e-na le libaktheria tse fokolang haholo maqebeng a tsona kamora matsatsi a 3 a kalafo ka litlolo tsohle tsa silevera.
Ho lekola phello ea li-dressing tsa silevera ho ruruha ha maqeba litoebeng tse nang le tšoaetso ea biofilm, likarolo tsa maqeba a tšoaelitsoeng ke biofilm tse phekoloang ka li-dressing tsa taolo kapa tsa silevera matsatsi a 3 li ile tsa silafatsoa ka immunohistochemically ho sebelisoa li-antibodies tse khethehileng bakeng sa li-neutrophils le li-macrophages. Ho fumana palo ea li-neutrophils le li-macrophages ka hare. lisele tsa granulation. Setšoantšo sa 5). Li-dressing tsohle tsa silevera li fokolitse palo ea li-neutrophils le li-macrophages maqebeng a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa ha li bapisoa le li-dressing tsa taolo tse seng tsa antimicrobial kamora matsatsi a mararo a kalafo. Leha ho le joalo, kalafo ka dressing ea letsoai la silevera e nang le oksijene e ile ea fella ka phokotso e kholo ea li-neutrophils (p = <0.0001) le li-macrophages (p = <0.0001) ha li bapisoa le li-dressing tse ling tsa silevera tse lekiloeng (Setšoantšo sa 5I,J). Le hoja Ag1+ + EDTA/BC e bile le phello e kholo ho biofilm ea maqeba, e fokolitse maemo a neutrophil le macrophage ka tekanyo e nyane ho feta dressing ea Ag1+. Maqeba a itekanetseng a tšoaelitsoeng ke S. aureus biofilm le ona a ile a bonoa kamora ho apesoa ka Ag (p = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008) le Ag1++ EDTA/BC (p = 0.0043) oxisols ha e bapisoa le taolo. Mekhoa e ts'oanang e bonoa bakeng sa neutropenia. bandage (Setšoantšo sa 5K). Leha ho le joalo, ke feela oxygenated Ag salt dressing e bontšitseng phokotso e kholo palong ea macrophages liseleng tsa granulation ha e bapisoa le taolo maqebeng a tšoaelitsoeng ke S. aureus biofilms (p = 0.0339) (Setšoantšo sa 5L).
Li-neutrophils le macrophages li ile tsa lekanngoa maqebeng a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa le Staphylococcus aureus biofilms kamora matsatsi a 3 a kalafo ka li-dressing tse sa thibeleng likokoana-hloko kapa tsa silevera. Li-neutrophils (AD) le macrophages (EH) li ile tsa lekanngoa likarolong tsa lisele tse nang le li-antibodies tse khethehileng bakeng sa li-neutrophils kapa macrophages. Tekanyo ea li-neutrophils (I le K) le macrophages (J le L) maqebeng a tšoaelitsoeng ke Pseudomonas aeruginosa (I le J) le Staphylococcus aureus (K & L) biofilms. N = 12 ka sehlopha. Li-graph li bontša phoso e tloaelehileng ea +/-, boleng ba bohlokoa ha bo bapisoa le dressing e sa thibeleng likokoana-hloko, * e bolela p = < 0.05, ** e bolela p = < 0.01; *** e bolela p = < 0.001; e bontša p = <0.0001).
Re ile ra hlahloba phello ea li-dressing tsa silevera pholisong e sa itšetleheng ka tšoaetso. Maqeba a sa tšoaelitsoeng a ile a phekoloa ka setlolo sa taolo se seng sa likokoana-hloko kapa setlolo sa silevera matsatsi a 3 (Setšoantšo sa 6). Har'a li-dressing tsa silevera tse lekiloeng, ke maqeba feela a phekoloang ka setlolo sa letsoai se nang le oksijene a ileng a bonahala a le manyane litšoantšong tsa macroscopic ho feta maqeba a phekoloang ka setlolo (Setšoantšo sa 6A-D). Tekanyo ea sebaka sa leqeba ho sebelisoa tlhahlobo ea histological e bontšitse hore sebaka se tloaelehileng sa leqeba kamora kalafo ka setlolo sa Ag oxysols e ne e le 2.35 mm2 ha e bapisoa le 2.96 mm2 bakeng sa maqeba a phekoloang ka sehlopha sa taolo, empa phapang ena ha ea ka ea fihlela bohlokoa ba lipalo-palo (p = 0.488) (Setšoantšo sa 6I). Ka lehlakoreng le leng, ha ho phokotso sebakeng sa leqeba e ileng ea bonoa kamora kalafo ka setlolo sa Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) kapa Ag1+ + EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) ha e bapisoa le sehlopha sa taolo. Ho tsosolosoa ha epithelial ho ile ha bonoa ka ho tlotsa ha Ag oxysol ha ho bapisoa le sehlopha sa taolo (30% khahlano le 22%, ka ho latellana), leha sena se sa ka sa fihlela bohlokoa (p = 0.067), sena se bohlokoa haholo 'me se tiisa liphetho tse fetileng. Ho tlotsa ka oxysol ho khothalletsa ho tsosolosoa ha epithelialization. -Ho tlotsa maqeba a sa tšoaetsoang17. Ka lehlakoreng le leng, kalafo ka ho tlotsa ha Ag1+ kapa Ag1+ + EDTA/BC ha ea ka ea ba le phello kapa ea bontša ho fokotseha ha ho tsosolosoa ha epithelialization ha ho bapisoa le taolo.
Tšusumetso ea ho tlama maqeba a silevera pholisong ea maqeba litoebeng tse sa tšoaetsoang ka ho buuoa ka botlalo. (AD) Litšoantšo tse emelang macroscopic tsa maqeba kamora matsatsi a mararo a kalafo ka ho tlama maqeba a taolo a seng a antimicrobial le ho tlama maqeba a silevera. (EH) Likarolo tse emelang maqeba tse nang le hematoxylin le eosin. Tekanyo ea sebaka sa maqeba (I) le peresente ea ho tsosolosa leqeba (J) li baliloe ho tsoa likarolong tsa histological bohareng ba leqeba ho sebelisoa software ea tlhahlobo ea litšoantšo (n = 11–12 ka sehlopha sa kalafo). Ligrafe li bontša phoso e tloaelehileng ea +/-. * e bolela p = <0.05.
Silver e na le nalane e telele ea tšebeliso e le phekolo ea likokoana-hloko ho foliseng maqeba, empa mekhoa e mengata e fapaneng le mekhoa ea ho fana ka eona e ka fella ka phapang ea katleho ea likokoana-hloko 18. Ho feta moo, litšobotsi tsa antibiofilm tsa litsamaiso tse itseng tsa ho fana ka silevera ha li utloisisoe ka botlalo. Le hoja karabelo ea 'mele ea moamoheli e sebetsa hantle khahlanong le libaktheria tsa planktonic, hangata ha e sebetse hantle khahlanong le biofilms19. Libaktheria tsa planktonic li felisoa habonolo ke macrophages, empa ka har'a biofilms, lisele tse kopantsoeng li baka mathata a mang ka ho fokotsa karabelo ea moamoheli ho isa bohōleng boo lisele tsa 'mele ea ho itšireletsa mafung li ka fetang apoptosis le ho lokolla lintlha tse bakang ho ruruha ho ntlafatsa karabelo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung20. Ho hlokometsoe hore li-leukocyte tse ling li ka kenella biofilms21 empa li sitoa ho phagocytose baktheria hang ha tšireletso ena e senyehile22. Mokhoa o akaretsang o lokela ho sebelisoa ho tšehetsa karabelo ea 'mele ea moamoheli khahlanong le tšoaetso ea biofilm ea maqeba. Ho tlosoa ha maqeba ho ka sitisa biofilm' meleng le ho tlosa boholo ba bioload, empa karabelo ea 'mele ea moamoheli e ka 'na ea se sebetse khahlanong le biofilm e setseng, haholo-holo haeba karabelo ea 'mele ea moamoheli e senyehile. Ka hona, mekhoa ea phekolo ea ho loantša likokoana-hloko tse kang li-dressing tsa silevera e ka tšehetsa karabelo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung le ho felisa tšoaetso ea biofilm. Sebopeho, ho tsepamisa mohopolo, ho qhibiliha, le substrate ea ho pepa li ka susumetsa katleho ea li-antimicrobial ea silevera. Lilemong tsa morao tjena, tsoelo-pele theknolojing ea ts'ebetso ea silevera e entse hore li-dressing tsena li sebetse haholoanyane9,23. Ha theknoloji ea li-dressing tsa silevera e ntse e tsoela pele, ho bohlokoa ho utloisisa katleho ea li-dressing tsena ho laoleng tšoaetso ea maqeba le, habohlokoa le ho feta, tšusumetso ea mefuta ena e matla ea silevera tikolohong ea maqeba le pholiso.
Phuputsong ena, re bapisitse katleho ea li-dressing tse peli tse tsoetseng pele tsa silevera le li-dressing tsa silevera tse tloaelehileng tse hlahisang li-ion tsa Ag1+ khahlanong le li-biofilms tse sebelisang mehlala e fapaneng ea in vitro le in vivo. Re boetse ra hlahloba phello ea li-dressing tsena tikolohong ea maqeba le pholiso e sa itšetleheng ka tšoaetso. Ho fokotsa tšusumetso ea matrix ea ho pepa, li-dressing tsohle tsa silevera tse lekiloeng li entsoe ka carboxymethylcellulose.
Tlhahlobo ea rona ea pele ea litlolo tsena tsa silevera khahlanong le li-biofilm tsa bokolone tsa Pseudomonas aeruginosa le Staphylococcus aureus e bontša hore, ho fapana le litlolo tsa setso tsa Ag1+, litlolo tse peli tsa silevera tse tsoetseng pele, Ag1+ + EDTA/BC le letsoai la Ag le nang le oksijene, li sebetsa ho 5. Li bolaea libaktheria tsa biofilm ka katleho ka matsatsi a 'maloa. Ho phaella moo, litlolo tsena li thibela ho thehoa hape ha biofilm ha li pepesehela libaktheria tsa planktonic khafetsa. Seaparo sa Ag1+ se ne se e-na le chloride ea silevera, motsoako o tšoanang oa silevera le matrix ea motheo joaloka Ag1+ + EDTA/BC, 'me se bile le phello e fokolang ho phela ha baktheria ka har'a biofilm nakong e tšoanang. Tlhokomeliso ea hore seaparo sa Ag1+ + EDTA/BC se ne se sebetsa hantle khahlanong le biofilm ho feta seaparo sa Ag1+ se nang le matrix e tšoanang le motsoako oa silevera e tšehetsa khopolo ea hore metsoako e meng ea hlokahala ho eketsa katleho ea chloride ea silevera khahlanong le biofilm, joalo ka ha ho tlalehiloe libakeng tse ling15. Liphetho tsena li tšehetsa khopolo ea hore BC le EDTA li bapala karolo e 'ngoe e tlatsetsang katlehong ea ho apara ka kakaretso le hore ho ba sieo ha karolo ena ho li-dressing tsa Ag1+ ho ka 'na ha tlatsetsa ho hloleheng ho bonts'a katleho ea in vitro. Re fumane hore li-dressing tsa letsoai la Ag tse nang le oksijene tse hlahisang li-ion tsa Ag2+ le Ag3+ li bontšitse katleho e matla ea ho loantša likokoana-hloko ho feta Ag1+ le maemong a tšoanang le a Ag1+ + EDTA/BC. Leha ho le joalo, ka lebaka la bokhoni bo phahameng ba redox, ha ho hlake hore na li-ion tsa Ag3+ li lula li le mafolofolo ebile li sebetsa hantle hakae khahlanong le li-biofilms tsa maqeba 'me ka hona li lokela ho ithutoa haholoanyane. Ho phaella moo, ho na le li-dressing tse ngata tse fapaneng tse hlahisang li-ion tsa Ag1+ tse sa kang tsa lekoa thutong ena. Li-dressing tsena li entsoe ka metsoako e fapaneng ea silevera, mahloriso le matrices ea motheo, e ka susumetsang ho fanoa ha li-ion tsa Ag1+ le katleho ea tsona khahlanong le li-biofilms. Hape hoa bohlokoa ho hlokomela hore ho na le mehlala e mengata e fapaneng ea in vitro le in vivo e sebelisoang ho lekola katleho ea li-dressing tsa maqeba khahlanong le li-biofilms. Mofuta oa mohlala o sebelisitsoeng, hammoho le letsoai le litaba tsa protheine tsa mecha ea phatlalatso e sebelisitsoeng mehlala ena, li tla susumetsa katleho ea li-dressing. Mohlaleng oa rona oa in vivo, re ile ra lumella biofilm ho hola ka hare ho vitro eaba re e fetisetsa holim'a letlalo la leqeba. Karabelo ea 'mele ea toeba ea moamoheli e sebetsa hantle khahlanong le libaktheria tsa planktonic tse sebelisitsoeng leqebeng, ka hona e etsa biofilm ha leqeba le ntse le fola. Ho eketsoa ha biofilm e hōlileng leqebeng ho fokotsa katleho ea karabelo ea 'mele ea moamoheli ho thehoeng ha biofilm ka ho lumella biofilm e hōlileng ho iponahatsa ka har'a leqeba pele pholiso e ka qala. Kahoo, mohlala oa rona o re lumella ho lekola katleho ea litlolo tse bolaeang likokoana-hloko ho biofilms e hōlileng pele maqeba a qala ho fola.
Hape re fumane hore ho lekana ha seaparo ho susumelitse katleho ea liaparo tsa silevera ho biofilms tse holisitsoeng ka har'a vitro le letlalo la kolobe. Ho kopana haufi le leqeba ho nkoa e le habohlokoa bakeng sa katleho ea seaparo sa ho bolaea likokoana-hloko24,25. Li-dressing tse nang le letsoai la Ag le nang le oksijene li ne li amana haufi le biofilms tse hōlileng, e leng se ileng sa fella ka phokotso e kholo palong ea libaktheria tse phelang ka har'a biofilm kamora lihora tse 24. Ka lehlakoreng le leng, ha li phekoloa ka liaparo tsa Ag1+ le Ag1+ + EDTA/BC, palo e kholo ea libaktheria tse phelang e ile ea sala. Li-dressing tsena li na le suture bolelele bohle ba seaparo, e leng se etsang libaka tse shoeleng tse thibelang ho kopana haufi le biofilm. Lithutong tsa rona tsa in vitro, libaka tsena tse sa amaneng li ile tsa thibela ho bolaoa ha libaktheria tse phelang ka har'a biofilm. Re ile ra hlahloba ho phela ha baktheria feela kamora lihora tse 24 tsa kalafo; Ha nako e ntse e ea, ha seaparo se ntse se tlala haholoanyane, ho ka ba le sebaka se fokolang se shoeleng, e leng se fokotsang sebaka sa libaktheria tsena tse phelang. Leha ho le joalo, sena se totobatsa bohlokoa ba sebopeho sa seaparo, eseng feela mofuta oa silevera seaparong.
Leha lithuto tsa in vitro li le molemo bakeng sa ho bapisa katleho ea mahlale a fapaneng a silevera, ho bohlokoa hape ho utloisisa litlamorao tsa litlolo tsena ho biofilms in vivo, moo lisele tsa moamoheli le likarabo tsa 'mele oa ho itšireletsa mafung li kenyang letsoho katlehong ea litlolo khahlanong le biofilms. Tšusumetso ea litlolo tsena ho biofilms ea maqeba e ile ea bonoa ka ho sebelisa microscopy ea elektrone ea scanning le ho taka biofilm ka EPS ho sebelisa lidae tsa DNA tsa intracellular le extracellular. Re fumane hore kamora matsatsi a 3 a kalafo, litlolo tsohle li ne li sebetsa hantle ho fokotsa DNA e se nang sele maqebeng a tšoaelitsoeng ke biofilm, empa seaparo sa Ag1+ se ne se sa sebetse hantle maqebeng a tšoaelitsoeng ke Staphylococcus aureus. Ho hlahloba microscopy ea elektrone ho boetse ho bontšitse hore ho ne ho e-na le libaktheria tse fokolang haholo maqebeng a phekoloang ka litlolo tsa silevera, leha sena se ne se bonahala haholoanyane ka seaparo sa letsoai sa Ag se nang le oksijene le seaparo sa Ag1+ + EDTA/BC ha se bapisoa le seaparo sa Ag1+. Lintlha tsena li bontša hore litlolo tsa silevera tse lekiloeng li bile le tšusumetso e fapaneng sebopehong sa biofilm, empa ha ho le e 'ngoe ea liaparo tsa silevera e ileng ea khona ho felisa biofilm, e tšehetsang tlhoko ea mokhoa o akaretsang oa kalafo ea tšoaetso ea biofilm ea maqeba; tšebeliso ea masela a silevera a matsoho. Kalafo e etelloa pele ke ho hloekisa 'mele ho tlosa boholo ba biofilm.
Maqeba a sa foleng hangata a boemong ba ho ruruha ho matla, 'me lisele tse ngata tse ruruhang li sala liseleng tsa leqeba nako e telele, li baka tšenyo ea lisele le ho felisa oksijene e hlokahalang bakeng sa metabolism e sebetsang hantle ea sele le ts'ebetso leqebeng26. Li-biofilms li mpefatsa tikoloho ena e mabifi ea maqeba ka ho ama pholiso hampe ka litsela tse fapaneng, ho kenyeletsoa ho thibela ho ata ha lisele le ho falla le ho kenya tšebetsong li-cytokine tse bakang ho ruruha27. Ha litlolo tsa silevera li ntse li sebetsa haholoanyane, ho bohlokoa ho utloisisa tšusumetso eo li nang le eona tikolohong ea leqeba le pholisong.
Hoa thahasellisa hore, leha li-dressing tsohle tsa silevera li amme sebopeho sa biofilm, li-dressing tsa letsoai la silevera tse nang le oksijene feela li ekelitse ho tsosolosoa ha maqeba ana a tšoaelitsoeng. Lintlha tsena li tšehetsa liphuputso tsa rona tsa pele17 le tsa Kalan et al. (2017)28, tse bontšitseng polokeho e ntle le chefo ea matsoai a silevera a nang le oksijene, kaha mahloriso a tlase a silevera a ne a sebetsa khahlanong le biofilms.
Phuputso ea rona ea hajoale e totobatsa phapang theknolojing ea silevera pakeng tsa litlolo tsa silevera tse bolaeang likokoana-hloko le tšusumetso ea theknoloji ena tikolohong ea maqeba le pholiso e sa itšetleheng ka tšoaetso. Leha ho le joalo, liphetho tsena li fapana le lithuto tse fetileng tse bontšang hore litlolo tsa Ag1+ + EDTA/BC li ntlafalitse litekanyetso tsa pholiso ea litsebe tsa mmutla tse lemetseng ka har'a 'mele. Leha ho le joalo, sena se ka bakoa ke liphapang mehlaleng ea liphoofolo, linako tsa tekanyo, le mekhoa ea ts'ebeliso ea baktheria29. Tabeng ena, litekanyo tsa maqeba li ile tsa nkuoa matsatsi a 12 kamora kotsi ho lumella metsoako e sebetsang ea litlolo ho sebetsa biofilm ka nako e telele. Sena se tšehetsoa ke phuputso e bontšitseng hore liso tsa maoto tse tšoaelitsoeng ke bongaka tse phekoloang ka Ag1+ + EDTA/BC qalong li ile tsa eketseha ka boholo kamora beke e le 'ngoe ea kalafo, ebe libekeng tse 3 tse latelang tsa kalafo ka Ag1+ + EDTA/BC le nakong ea libeke tse 4 tsa tšebeliso ea meriana e seng ea likokoana-hloko.
Mefuta le mahloriso a itseng a silevera a kile a bontšoa hore a na le chefo ho vitro 11, empa liphetho tsena tsa in vitro ha se kamehla li fetolelang liphellong tse mpe ho vivo. Ho phaella moo, tsoelo-pele theknolojing ea silevera le kutloisiso e betere ea metsoako ea silevera le mahloriso ho li-dressing li lebisitse nts'etsopele ea li-dressing tse ngata tsa silevera tse sireletsehileng le tse sebetsang. Leha ho le joalo, ha theknoloji ea ho roala silevera e ntse e tsoela pele, ho bohlokoa ho utloisisa tšusumetso ea li-dressing tsena tikolohong ea maqeba31,32,33. Ho ile ha tlalehoa pele hore sekhahla se eketsehileng sa ho tsosolosa epithelialization se tsamaellana le karolo e eketsehileng ea li-macrophage tsa M2 tse khahlanong le ho ruruha ha li bapisoa le phenotype ea M1 e hlahisang ho ruruha. Sena se hlokometsoe mohlaleng o fetileng oa toeba moo li-dressing tsa maqeba tsa silevera tsa hydrogel li neng li bapisoa le sulfadiazine ea silevera le hydrogels tse seng tsa antimicrobial34.
Maqeba a sa foleng a ka 'na a bontša ho ruruha ho feteletseng 'me ho hlokometsoe hore boteng ba li-neutrophil tse ngata bo ka ba kotsi ho pholisong ea maqeba35. Phuputsong ea litoeba tse senyehileng ke li-neutrophil, boteng ba li-neutrophil bo liehisitse ho khutlisetsoa morao. Boteng ba li-neutrophil tse ngata bo lebisa maemong a holimo a li-protease le mefuta ea oksijene e arabelang, joalo ka superoxide le hydrogen peroxide, tse amanang le maqeba a sa foleng le a folang butle37,38. Ka mokhoa o ts'oanang, keketseho ea lipalo tsa macrophage, haeba e sa laolehe, e ka lebisa ho pholisong ea maqeba e liehang39. Keketseho ena e bohlokoa haholo haeba macrophage e sa khone ho fetoha ho tloha phenotype ea pro-inflammatory ho ea phenotype ea pro-hepitre, e leng se fellang ka hore maqeba a hlōlehe ho tsoa mohatong oa ho ruruha oa pholiso40. Re bone phokotseho ea li-neutrophil le macrophage maqebeng a tšoaelitsoeng ke biofilm kamora matsatsi a 3 a kalafo ka li-dressing tsohle tsa silevera, empa phokotseho e ne e bonahala haholo ka li-dressing tsa letsoai tse nang le oksijene. Phokotso ena e ka ba phello e tobileng ea karabelo ea 'mele ea ho itšireletsa mafung ho silevera, karabelo ea ho fokotseha ha boima ba 'mele, kapa leqeba le leng mohatong oa morao oa pholiso 'me ka hona lisele tsa 'mele tsa ho itšireletsa mafung leqebeng lia fokotseha. Ho fokotsa palo ea lisele tsa ho ruruha leqebeng ho ka boloka tikoloho e loketseng pholiso ea leqeba. Mokhoa oa ts'ebetso oa hore na Ag oxysalts e khothalletsa pholiso e sa itšetleheng ka tšoaetso joang ha o hlake, empa bokhoni ba Ag oxysalts ba ho hlahisa oksijene le ho senya maemo a kotsi a hydrogen peroxide, e leng mokena-lipakeng oa ho ruruha, bo ka hlalosa sena 'me bo hloka thuto e eketsehileng17.
Maqeba a sa foleng a tšoaelitsoeng a sa foleng a baka bothata ho lingaka le bakuli. Le hoja li-dressing tse ngata li bolela hore li sebetsa hantle ho thibela likokoana-hloko, lipatlisiso ha li atise ho tsepamisa maikutlo linthong tse ling tsa bohlokoa tse susumetsang tikoloho e nyenyane ea maqeba. Phuputso ena e bontša hore mahlale a fapaneng a silevera a na le katleho e fapaneng ea ho thibela likokoana-hloko 'me, habohlokoa le ho feta, liphello tse fapaneng tikolohong ea maqeba le pholiso, ho sa tsotelehe tšoaetso. Le hoja lithuto tsena tsa in vitro le in vivo li bontša katleho ea li-dressing tsena ho phekoleng tšoaetso ea maqeba le ho khothalletsa pholiso, liteko tse laoloang ka mokhoa o sa reroang lia hlokahala ho lekola katleho ea li-dressing tsena tleliniking.
Disete tsa data tse sebedisitsweng le/kapa tse sekasekilweng nakong ya phuputso ya hajwale di fumaneha ho mongoli ya tsamaellanang ha ho kopuwa ka tsela e utlwahalang.
Nako ea poso: Phupu-15-2024